مؤسسة بيرد باركر آجار ، إعداد واستخدام

ال بيرد باركر آجار إنها ثقافة ثقافة صلبة وانتقائية وتفضيلية. تم إنشاؤه في عام 1962 للكشف عن المكورات العنقودية الإيجابية والعد (تجلط الدم)المكورات العنقودية الذهبية).

وهو يتألف من الكازين هيدرليزيت البنكرياس ، استخراج اللحم ، خلاصة الخميرة ، كلوريد الليثيوم ، الجلايسين ، بيروفات الصوديوم ، تلوريت البوتاسيوم ، مستحلب صفار البيض والأجار.

ويستند باير باركر آجار على قدرة المكورات العنقودية الذهبية الحد من التيلوريت وإنتاج الليسيثيناز. كل الخصائص تولد مستعمرة مع خصائص محددة لهذا النوع. لذلك ، فإنه يوفر فعالية كبيرة في الكشف عن هذه الكائنات الحية الدقيقة.

المستعمرات النموذجية لل المكورات العنقودية الذهبية فهي سوداء أو رمادية داكنة ، مع حدود عديمة اللون وهالة واضحة تحيط بها ، وتميز نفسها عن بقية الكائنات الحية الدقيقة. يمكن العثور على هذا الممرض في العينات السريرية ، المياه ، مستحضرات التجميل والأطعمة النيئة أو المطبوخة.

إن تشخيصه أو اكتشافه مهم للغاية ، نظرًا لتنوع الأمراض التي ينتجها ، مثل التسمم الغذائي ومتلازمة الجلد المحروق ومتلازمة الصدمة السامة والخراجات والتهاب السحايا وتسمم الدم والتهاب الشغاف وغيرها..

مؤشر

• 1 مؤسسة
  • 1.1 القوة الغذائية
  • 1.2 انتقائي
  • 1.3 التفاضلية
• 2 إعداد
  • 2.1 مستحلب صفار البيض
  • 2.2 تلوريت البوتاسيوم بمعدل 1٪ وزن / وزن
  • 2.3 إعداد وسط الثقافة
• 3 استخدام
  • 3.1 العينات السريرية
  • 3.2 عينات الغذاء
  • 3.3 عينات المياه
• 4 مراقبة الجودة
• 5 توصيات
• 6 المراجع

مؤسسة

قوة مغذية

تعتبر الكازين هيدرليزيت البنكرياس وخلاصة اللحم وخلاصة الخميرة من مصادر المغذيات والفيتامينات والمعادن اللازمة لتطوير الميكروبات العامة ، في حين أن البيروفات والجليكاين من المركبات التي تدعم النمو المحدد ل المكورات العنقودية الذهبية.

انتقائي

إن Baird Parker agar انتقائي لأنه يحتوي على مواد تمنع نمو النباتات المرافقة لها ، مع تشجيع تطوير المكورات العنقودية الذهبية. المركبات المثبطة هي كلوريد الليثيوم وتيلوريت البوتاسيوم.

الفارق

وهذا يعني يسمح للتمييز المكورات العنقودية الذهبية من بقية المكورات العنقودية سلبية المخثر. المكورات العنقودية الذهبية لديه القدرة على تقليل التيلوريت إلى التيلوريوم الحر المعدني الأسود ، وتشكيل مستعمرات رمادية سوداء أو داكنة.

وبالمثل ، يوفر صفار البيض الركائز لإثبات وجود إنزيم الليسيثيناز والليباز. المكورات العنقودية الذهبية إنه ليسيثيناز إيجابي وبالتالي سيتم ملاحظة هالة واضحة حول المستعمرة ، مما يشير إلى أن الليسيثين تم تحلله.

بهذا المعنى ، فإن المظهر في أجار مستعمرات سوداء أو رمادية داكنة مع وجود هالة فاتحة تشير إلى وجود المكورات العنقودية الذهبية. 

إذا تم تشكيل منطقة هطول الأمطار ، فهذا يدل على وجود نشاط الليباز. بعض سلالات المكورات العنقودية الذهبية هم الليباز الإيجابي والآخر سلبي.

في حالة أن المكورات العنقودية الذهبية إذا كان الليباز موجبًا ، فسيتم ملاحظة منطقة معتمة حول المستعمرة الرمادية السوداء أو الداكنة ، ثم الهالة الصافية بسبب عمل الليسيثيناز..

مستعمرات البكتيريا بخلاف المكورات العنقودية الذهبية قادرة على النمو في هذه الوسيلة سوف تتطور مستعمرات عديمة اللون أو بنية اللون ، دون هالة حولها.

يمكن أيضًا ملاحظة مستعمرات سوداء غير نمطية بحدود عديمة اللون أو بدونها ، ولكن بدون هالة واضحة. لا ينبغي أن تؤخذ هذه المستعمرات في الاعتبار ، فهي لا تتوافق مع المكورات العنقودية الذهبية.

إعداد

مستحلب صفار البيض

خذ بيضة دجاج طازجة ، واغسلها جيدًا وضعيها من 2 إلى 3 ساعات في كحول 70٪. ثم ، تفتح البيضة بطريقة معقمة ويفصل البيض الأبيض بعناية عن الصفار. بعد ذلك يتم أخذ 50 مل من الصفار وتخلط مع 50 مل من محلول فسيولوجي معقم.

تيلوريت البوتاسيوم بنسبة 1 ٪ ث / ت

بعض المنازل التجارية تبيع 1 ٪ البوتاسيوم التيلوريت جاهزة للاستخدام. يضاف إلى الوسيط قبل أن يصلب الوسيط.

لتحضير هذا المحلول في المختبر ، تزن 1.0 غرام من البوتاسيوم تيلوريت ويذوب في جزء من الماء. بعد ذلك يتم الانتهاء من كمية المياه إلى 100 مل. يجب تعقيم المحلول بطريقة الترشيح.

إعداد الثقافة المتوسطة

تزن 60 غرام من المتوسط ​​المجفف وتذوب في 940 مل من الماء المقطر. اترك الخليط في راحة لمدة 5 إلى 10 دقائق تقريبًا.

تطبيق الحرارة عن طريق تحريك المتوسطة في كثير من الأحيان لتحسين عملية الذوبان. واسمحوا يغلي لمدة دقيقة. تعقيم في الأوتوكلاف في 121 درجة مئوية لمدة 15 دقيقة.

واسمحوا الوقوف حتى تصل إلى درجة حرارة 45 درجة مئوية وإضافة 50 مل من مستحلب صفار البيض و 10 مل من 1 ٪ تلوريت. تخلط جيدا وتقدم 15-20 مل على أطباق بتري معقمة.

السماح للتصلب ، طلب مقلوب في لويحات وتخزينها في الثلاجة حتى الاستخدام.

يجب أن يكون الرقم الهيدروجيني النهائي للوسيط المعد عند 6.8 ± 0.2.

قبل زرع عينة ، انتظر حتى تأخذ اللوحة درجة الحرارة المحيطة. زرع لوحات عن طريق شق أو عن طريق زرع على السطح مع ملعقة Drigalski.

لون الوسط المجفف هو لون فاتح ولون الوسط المعد هو أصفر فاتح.

استعمال

العينات السريرية

تزرع العينات السريرية مباشرة عن طريق تفريغ جزء من المادة في نهاية واحدة من اللوحة ، ومن هناك يتم استنشاقه عن طريق الإرهاق. احتضان لمدة 24 إلى 48 ساعة في 35-37 درجة مئوية.

عينات الغذاء

تزن 10 غرام من عينة الطعام وتجانس في 90 مل من المياه المفلتة 0.1 ٪ ، يتم إعداد التخفيفات من هناك ، إذا لزم الأمر. تطعيم اللوحات في ثلاث نسخ مع 0.3 مل من الحلول المعدة ، والبذر على السطح مع ملعقة Drigalski. احتضان لمدة 24 إلى 48 ساعة في 35-37 درجة مئوية.

هذه المنهجية تسمح لحساب المستعمرات النموذجية التي تم الحصول عليها وهي مثالية عند وجود المكورات العنقودية الذهبية فوق 10 CFU لكل غرام / مل عينة.

إذا كنت تشك في أن كمية المكورات العنقودية الذهبية إنه صغير أو يوجد الكثير من النباتات المصاحبة ، يقترح إثراء العينة في مرق الصويا تريبتيكس مع 10 ٪ كلوريد الصوديوم و 1 ٪ بيروفات الصوديوم. وهذا لصالح نمو المكورات العنقودية الذهبية وسوف تمنع تطور النباتات المصاحبة. سيتم غرس الأنابيب الغائمة في أجار Baird Parker.

عينات المياه

في نظام الترشيح بالفراغ والمعقم ، يتم ترشيح 100 مل من الماء ، ثم تتم إزالة الغشاء الدقيق البالغ 0.4 ميكرون بمشابك معقمة وتوضع على صفيحة Baird Parker. احتضان لمدة 24 إلى 48 ساعة في 35-37 درجة مئوية. هذه التقنية تسمح لحساب المستعمرات النموذجية لل المكورات العنقودية الذهبية.

مراقبة الجودة

لتقييم جودة Baird Parker agar ، يمكن استخدام سلالات معروفة ، مثل المكورات العنقودية الذهبية ATCC 25923, المكورات العنقودية الذهبية ATCC 6538, المكورات العنقودية الجلدية ATCC 12228, الإشريكية القولونية ATCC 25922 أو بروتيوس ميرابيليس ATCC 43071.

في حالة سلالات المكورات العنقودية الذهبية من المعروف أن ATCC يقلل من التيلوريت ، وهو الليباز الإيجابي والليسيثينيز الإيجابي. لذلك يجب أن يكون هناك تطور مرضٍ وتنمو مستعمرات محدبة ذات مركز أسود وحافة عديمة اللون ، مع هالة غير شفافة وهالة أخرى أكثر وضوحًا خارجيًا.

من ناحية أخرى ، S. epidermidis من المتوقع أن يكون هناك تطور ضعيف في هذه الوسيلة ، مع وجود مستعمرات ذات لون بني رمادي إلى مستعمرات سوداء.

إلى كولاي و P. mirabilis من المتوقع أن يتم تثبيته كليًا أو جزئيًا. في حالة النمو ، سوف تتطور المستعمرات البنية دون منطقة غير شفافة ، ولا هالة صافية.

توصيات

-يجب عدم تسخين الوسيط بعد إضافة التيلوريت وصفار البيض.

-يعد تحضير مستحلب صفار البيض وإضافته في الوسط خطوة ضعيفة للغاية للتلوث. يجب توخي الحذر الشديد.

-إذا كان هناك وجود مستعمرات نموذجية من المكورات العنقودية الذهبية يجب تأكيده عن طريق إجراء اختبار تجلط الدم لسلالة قال.

-إذا كانت هناك نتائج مشكوك فيها مع تجلط الدم ، يجب إجراء اختبارات تأكيدية أخرى.

-احرص على عدم الخلط بين وجود مستعمرات نموذجية من المكورات العنقودية الذهبية مع المستعمرات غير التقليدية من اللون الأسود.

مراجع

1. المساهمون في ويكيبيديا. باير باركر آجار. ويكيبيديا ، الموسوعة الحرة. 15 مارس 2017 ، 19:36 بالتوقيت العالمي. متاح في: wikipedia.org/ تم الوصول إليه في 18 فبراير 2019.
2. معامل BD. بيرد باركر آجار. 2006. متوفر في: bd.com
3. مختبرات بريطانيا. بيرد باركر قاعدة آجار. 2015. متوفر في: britanialab.com
4. مختبرات فرانسيسكو صوريا ميلجويزو. 2009. بيرد باركر آجار. متاح في: http://f-soria.es/Inform
5. مختبرات بريطانيا. تلوريت البوتاسيوم. 2015. متوفر في: britanialab.com
6. Alarcón-Lavín M، Oyarzo C، Escudero C، Cerda-Leal F، Valenzuela F. Carrying المكورات العنقودية الذهبية نوع A من السموم المعوية ، في مسحات البلعوم الأنفي لدى مناديي الأغذية. القس ميد تشيلي 2017؛ 145: 1559-1564
7. الفنزويلي قياسي كوفين 1292-89. (1989). الغذاء. العزلة والعد المكورات العنقودية الذهبية. متوفر في:sencamer.gob.ve