مؤسسة آجار BHI ، إعداد واستخدامات



ال BHI أجار أو Brain Heart Infusion هي وسيلة مغذية قوية للثقافة. في الإسبانية نشير إليها باسم أجار ضخ القلب. إنها وسيلة استنبات غير انتقائية ، مما يعني أنه يمكن تطوير جميع أنواع البكتيريا إيجابية الجرام وسالبة الجرام ، وكذلك بعض الفطريات الخميرة والخيطية.

يتكون من عجول القلب والقلب ، هدروليزات هضمية من أنسجة الحيوانات ، الكازين هيدرليزيت البنكرياس ، كلوريد الصوديوم ، الجلوكوز ، فوسفات الصوديوم والأجار.

تجدر الإشارة إلى أن BHI أجار هي واحدة من وسائل الإعلام الأكثر شيوعا الثقافة في مختبرات علم البكتريا. يمكن استخدامه دون ملاحق كثقافة أولية ، ثقافة فرعية للمستعمرات التي تم الحصول عليها في وسائط انتقائية أخرى أو لصيانة سلالات في المختبر.

من ناحية أخرى ، إنها وسيلة مثالية لاستخدامها كقاعدة في إعداد الوسائط المخصبة ، مثل أجار الدم وأجار الشوكولاتة. كلاهما مثالي لعزل الكائنات الحية الدقيقة المطلوبة من الناحية الغذائية. ومع ذلك ، يجب أن يؤخذ في الاعتبار أنه بما أنه يحتوي على الجلوكوز فإنه لا يكفي مراقبة أنماط انحلال الدم.

وبالمثل ، يمكن استخدام BHI agar لإعداد وسائل خاصة لعزل الكائنات الحية الدقيقة المسببة للأمراض من النمو الصعب في وسائل الإعلام المشتركة ، من بينها: Haemophilus sp, فرانسيسلا تولينسيس ، خناق الدكتريا وكبسولات هيستوبلازما.

مع مضافة المضادات الحيوية BHI أجار يصبح وسيلة انتقائية لعزل الفطريات.

مؤشر

  • 1 مؤسسة
  • 2 إعداد
    • 2.1 الأوتاد
    • 2.2 لوحات
    • 2.3 إعداد أجار الدم
  • 3 الاستخدامات
    • 3.1 استخدم بدون ملاحق
    • 3.2 كقاعدة آغار لإعداد وسائل الإعلام الأخرى
  • 4 مراقبة الجودة
  • 5 المراجع

مؤسسة

إنها وسيلة للثقافة المغذية لعزل الكائنات الحية الدقيقة التي تتطلب الكثير من القدرة ، وزيادة القدرة على تخصيبها بإضافة الدم والمكملات الغذائية الأخرى.

إنه مستنبت غير انتقائي ، وبالتالي فإنه يسمح بنمو معظم البكتيريا إيجابية الجرام وسالبة الجرام ، وكذلك بعض الفطريات. ومع ذلك ، يمكن أن تصبح انتقائية مع إضافة المضادات الحيوية.

يحتوي الوسط على تسريب دماغ العجل والقلب ، وهيدليزيت الببتيد من الأنسجة الحيوانية وكازين هيدروليزات البنكرياس ؛ كل هذه المركبات تعمل كمصادر للفيتامينات والأحماض الأمينية والنيتروجين والكربون.

الجلوكوز هو الكربوهيدرات التي توفر الطاقة للكائنات الحية الدقيقة بمجرد تخميرها. في حين أن كلوريد الصوديوم وفوسفات الصوديوم يحافظان على توازن التناضح ويوفر درجة حموضة قريبة من الحياد. أخيرًا ، يعطي الأجار الاتساق القوي للوسيط.

إعداد

تزن 52 غراما من المتوسط ​​المجفف وتذوب في لتر واحد من الماء المقطر. قم بإحضار الخليط إلى مصدر للحرارة حتى يغلي ، مع التحريك بشكل متكرر أثناء عملية الذوبان.

يمكنك تحضير أسافين أو ألواح BHI agar دون إضافات.

الأوتاد

لتحضير الأوتاد ، يخدم المستحضر حتى يملأ نصف كل أنبوب ، ويغطى ويطهر في الأوتوكلاف عند 121 درجة مئوية لمدة 15 دقيقة ، عند الخروج للاستلقاء على قاعدة حتى يصلب. ثم تخزينها في الثلاجة حتى الاستخدام.

لوحات

يتم تعقيم الخليط الذائب عند درجة حرارة 121 مئوية لمدة 15 دقيقة ، عندما يترك يسمح له بالتبرد إلى 50 درجة مئوية ، ويتم تقديم 20 مل من الوسط في أطباق بتري المعقمة. يُسمح لهم بالتصلب والانعكاس والتخزين في الثلاجة حتى يتم استخدامها. السماح لوحات لاتخاذ درجة حرارة الغرفة قبل الزرع.

يجب أن يكون الرقم الهيدروجيني للمتوسط ​​7.4 ± 0.2.

الوسيط غير مستعد للبيج وإعداده كهرماني فاتح.

إعداد أجار الدم

بعد تعقيم الوسط ، تبرد إلى درجة حرارة حوالي 45 إلى 50 درجة مئوية ، في هذا الوقت تضاف الدم (50 مل) ، وتخلط بلطف للتجانس وتقديم 20 مل من العقيم في كل طبق بتري. إذا تشكلت الفقاعات على اللوحة ، فينبغي أن يتم تمرير شعلة الموقد بسرعة فوق الفقاعات للقضاء عليها.

وبالمثل ، يمكن تحضير وسائط خاصة عن طريق إضافة المواد المضافة المقابلة عندما يصل الخليط إلى درجة حرارة تتراوح من 45 إلى 50 درجة مئوية.

الوسط هو الكرز الأحمر.

تطبيقات

استخدام دون ملاحق

BHI أجار بدون إضافات مفيد كثقافة أولية ولزرع سلالات نقيّة من الكائنات الحية الدقيقة متوسطة أو متطلّبة لتحديدها لاحقًا.

نظرًا لكونه وسيطًا ذو لون فاتح ، فهو مثالي لمراقبة الأصباغ وأيضًا لأنه لا يحتوي على مواد متداخلة ، يمكن استخدامه لإجراء اختبارات كيميائية حيوية ، مثل أوكسيديز وكاتالاز ، أو لإجراء اختبارات كيميائية حيوية أخرى من المستعمرات الناشئة عن هذا أجار.

وبالمثل ، تستخدم أسافين آجار BHI على نطاق واسع في صيانة السلالات لفترة محددة في المختبر (bacterioteca).

يتم احتضان الأطباق أو الأوتاد المزروعة على السطح مع سلالات بكتيرية عند 37 درجة مئوية لمدة 24 إلى 48 ساعة. بينما ، في الفطريات ، تعتمد درجة الحرارة ووقت الحضانة على نوع الفطريات المطلوبة.

كقاعدة آغار لإعداد وسائل الإعلام الأخرى

مع هذه القاعدة يمكن إعداد وسائل الإعلام المخصب والانتقائي.

المخصب

وتتمثل مهمتها الرئيسية في أن تكون بمثابة أساس في إعداد آجار الدم للاستخدام الروتيني في مختبرات الأحياء الدقيقة. خصوصا ، قاعدة BHI مفضية لعزل سلالات العقدية sp. ومع ذلك ، فإنه من عيوب عدم ملائمة لمراقبة أنماط انحلال الدم لأنه يحتوي على الجلوكوز.

كما انها تستخدم في تحضير الأرنب أو الحصان آجار دم لعزل Haemophilus sp. للحصول على نتائج أفضل ، يمكنك إضافة ملحق التخصيب (IsoVitaleX).

إذا كانت العينات تأتي من الجهاز التنفسي إلى الأجار ، يمكن إضافة باكيتراسين لتثبيط النباتات المصاحبة وزيادة احتمال استرداد سلالات Haemophilus sp.

من ناحية أخرى ، يمكن تحضير أجار الدم (الخروف أو الإنسان) باستخدام سيرين التيلوريت لعزله الدفتريا الخناق. وبالمثل ، من المفيد تحضير أجار دم الأرنب ، مع إضافة السيستين والجلوكوز لعزل فرانسيسلا تولينسيس.

يتم زرع لوحات أجار الدم عن طريق الإرهاق وحضنت في 35-37 درجة مئوية لمدة 24-48 ساعة في محبب (5-10 ٪ CO)2).

انتقائي

هذه الوسيلة مع إضافة المضادات الحيوية يمكن أن تحل محل Sabouraud أجار لعزل الفطريات.

مزيج من BHI أجار مع الكلورامفينيكول - الجنتاميسين أو البنسلين - ، الستربتومايسين ودم الخيول مثالية لعزل هستوبلازما كبسولات.

اعتمادا على الكائنات الحية الدقيقة لتكون معزولة ، ويوصى الحضانة في 35-37 درجة مئوية أو في درجة حرارة الغرفة في aerobiosis. في بعض الأحيان تكون الحضانة ضرورية في كلا نطاقي درجة الحرارة ، باستخدام صفحتين لهذا الغرض.

بعض الفطريات تحب داء المشعرات يجب حضنها في درجة حرارة الغرفة لمدة تصل إلى 7 أيام.

مراقبة الجودة

من كل دفعة تم إعدادها ، يوصى باحتضان 1 طبق أو إسفين عند 37 درجة مئوية لمدة 24 ساعة والتحقق من عدم وجود نمو ؛ مهم بشكل خاص عند إعداد أجار الدم ، لأنه وسيلة ملوثة بسهولة.

من ناحية أخرى ، يمكن تقييم جودة الوسط عن طريق تلقيح سلالات قياسية معروفة أو معتمدة ومراقبة تطورها.

في هذا المعنى ، لتقييم BHI أجار دون إضافات ، سلالات الإشريكية القولونية ATCC 25922, المكورات العنقودية الذهبية ATCC 25923 أو المبيضات البيض ATCC 10231. يتم احتضانها عند 37 درجة مئوية في aerobiosis لمدة 24 إلى 48 ساعة. في جميع الحالات ، من المتوقع نمو مرض.

لتقييم لوحات أجار الدم ، سلالات  العقدية المقيحة ATCC 19615, العقدية الرئوية ATCC 6305 أو Trichophyton mentagrophytes ATCC 9533.

يتم تحضين السلالات البكتيرية عند 37 درجة مئوية في المكروفيليك لمدة 24 ساعة ، في حين يتم تحضين الفطريات في درجة حرارة الغرفة في غرفة رطبة لمدة تصل إلى 7 أيام. في جميع الحالات ، من المتوقع نمو مرض.

مراجع

  1. مختبرات بريطانيا. الدماغ القلب التسريب آجار. 2015. متوفر في: britanialab.com.
  2. معامل BD تسريب دماغ القلب (BHI) آجار. 2013. متوفر في: bd.com.
  3. معامل ديفكو فرانسيسكو سوريا ميلغويزو ، إس. الدماغ القلب التسريب آجار. 2009.
  4. مختبر نيوجين. الدماغ القلب التسريب آجار. متاح في: foodsafety.neogen.com
  5. غيل م أجار الدم: الأساس والاستخدام والتحضير. 2018. متوفر في: lifeder.com.
  6. المساهمون في ويكيبيديا. تسريب دماغ القلب ويكيبيديا ، الموسوعة الحرة. 19 سبتمبر 2018 ، 03:58 بالتوقيت العالمي. متاح في: wikipedia.org. تم الوصول إليه في 2 مارس 2019.
  7. Forbes B، Sahm D، Weissfeld A. (2009). التشخيص الميكروبيولوجي لبيلي وسكوت. 12 إد. افتتاحية Panamericana S.A. الأرجنتين.