أساس الشوكولاته آجار ، واستخدامات وإعداد



ال أجار الشوكولاته بل هو وسيلة ثقافة قوية ، المخصب ، غير انتقائية وغير التفاضلية. يستخدم أساسا لعزل الكائنات الحية الدقيقة التي تتطلب من وجهة نظر التغذية ، على الرغم من أنها يمكن أن تنمو أي نوع من البكتيريا.

هذا هو السبب في أن فائدته تزداد بشكل خاص في بذر العينات التي تكون عادة معقمة ، مثل CSF وسائل المفاصل. على الرغم من أنه يتم تضمينه أيضًا ضمن الوسائل المختارة لبذر عينات متعددة الميكروبات ، ولكن في هذه الحالات ، من الضروري إضافة المضادات الحيوية التي تمنع النباتات المصاحبة.

هذه الوسيلة لها لون بني مميز يشبه إلى حد كبير الشوكولاته ، ومن هنا جاءت تسميتها. يشبه المستحضر جدا أجار الدم ، في هذه الحالة فقط يجب تسخين الدم من أجل كسر خلايا الدم الحمراء.

إعداده ، مثل أجار الدم ، حساس للغاية ، لأنه ملوث بسهولة. لهذا السبب تفضل العديد من المختبرات الحصول على هذه الوسيلة التي أعدتها بالفعل المنازل التجارية التي تضمن جودتها.

مؤشر

  • 1 مؤسسة
  • 2 الاستخدامات
    • 2.1 أجار الشوكولاته أعدت مع أجار كولومبيا
    • 2.2 أجار الشوكولاتة المحضرة باستخدام أجار أساس GC (للمكورات البنية)
    • 2.3 أجار الشوكولاتة المحضرة مع أجار مولر هينتون
    • 2.4 آجار الشوكولاتة المحضرة مع ثاير آجار آجار
  • 3 إعداد
    • 3.1 الحسابات
    • 3.2 يزن ويذوب
    • 3.3 تعقيم
    • 3.4 تجميع الدم
    • 3.5 طريقة أخرى لإعداد أجار الشوكولاته دون استخدام الدم
  • 4 مراقبة الجودة
  • 5 المراجع

مؤسسة

تتكون هذه الوسيلة من قاعدة أجار غنية بالمواد الغذائية والدم الساخن. يوفر انحلال خلايا الدم الحمراء العامل X (الهيمين) والعامل الخامس (NAD) ، وهما ضروريان لنمو بعض الكائنات الحية الدقيقة ، مثل الجنس. المستدمية. كما انها مفيدة جدا لعزل Neisserias sp.

مثل أجار الدم ، يمكن استخدام وسائط مختلفة كأجار أساس حسب الحاجة. من بين الوسائل المستخدمة هي ضخ قلب الدماغ وإجار الصويا التربتيكاز ، على الرغم من أن أكثرها موصى به هي كولومبيا آجار ومولر هينتون وجي سي آجار وثاير مارتن آجار..

بعض أنواع أجار الشوكولاته تشمل مكملاً مخصبًا متاحًا تجاريًا يسمى Isovitalex أو Polivitex.

تحتوي هذه المكملات على فيتامين ب12, L- الجلوتامين ، الأدينين ، هيدروكلوريد الجوانيين ، حمض أمينوبنزويك ، نيكوتيناميد أدينين دينوكليوتيد (NAD) ، ثيامين بيروفوسفات ، نترات الحديديك ، هيدروكلوريد الثيامين ، ثيستين هيدروكلوريد ، سيستين وهيدروكلوريد.

من المهم أن نلاحظ أن أجار الشوكولاتة مخصب أكثر من أجار الدم ، لكنه لا يسمح بمراقبة أنماط انحلال الدم..

تطبيقات

أجار الشوكولاته أعدت مع أجار كولومبيا

تحتوي هذه الوسيلة على الكازين والقلب المهضوم البنكرياس ، الببتيد اللحوم المهضومة ، كلوريد الصوديوم ، أجار ، خلاصة الخميرة ونشاء الذرة. كما أنه غني بالفيتامينات والمعادن والأحماض الأمينية الأساسية.

هذه القاعدة بالدم الساخن مثالية لعزل بكتيريا جنس النيسرية. من ناحية أخرى ، إذا تمت إضافة ملحق لـ Brucella إلى الوسط ، فيمكن عزل الكائنات الحية الدقيقة المذكورة أعلاه. يتم تحسين النتائج باستخدام دم الحصان.

أجار الشوكولاتة المحضرة مع أجار أساس GC (للمكورات البنية)

تحتوي هذه الوسيلة على بيبتونز ونشا الذرة ومخازن أحادية القاعدة وثنائية الكلوريد وكلوريد الصوديوم وأجار.

تأتي معظم عروض أجار الشوكولاته المحضرة تجاريًا مع هذه القاعدة ولا تحتوي على دم مسخّن ، ولكن مزيجًا اصطناعيًا من الهيمين ومكملًا كيميائيًا لعوامل النمو والفيتامينات والمعادن والأحماض الأمينية والعامل الخامس والجلوكوز..

أجار الشوكولاتة المحضرة مع أجار مولر هينتون

يتم استخدامه لإجراء اختبار الحساسية المضادة للميكروبات من الكائنات الحية الدقيقة التي تتطلب ، مثل العقدية الرئوية باستخدام 5 ٪ دم الكبش ساخنة.

كما أنه يخدم في العزلة الأولية لنيسرياس والديموفيلوس ، ولكن في حالة معينة من العزلة المستدمية يفضل استخدام دم الحصان لأنه مصدر غني للعامل X و V.

من ناحية أخرى ، إذا كانت العينة المزروعة تأتي من منطقة غير معقمة ، يوصى بإضافة المضادات الحيوية لمنع النباتات الطبيعية في المنطقة..

مثال لعينات الجهاز التنفسي حيث يشتبه بوجود بكتيريا للجنس المستدمية باكيتراسين يستخدم لمنع نمو المكورات العنقودية ، Micrococcus ، العقدية و النيسرية الناخرية.

في حالة عينات من الحلق التناسلي ، حيث يشتبه المستدمية الدكرية, تم استخدام أجار شوكولاتة تم تحضيره بالطريقة التالية بنجاح: أجار مولر-هينتون مع 5٪ من دم حصان الشوكولاتة ، وإثراء Isovitalex بنسبة 1٪ و 3 ميكروغرام / مل من الفانكومايسين.

أجار الشوكولاته المحضرة مع ثاير أجار أجار

هذه الوسيلة خاصة لعزل النيسرية البنية. يجب أن يحتوي على مضادات حيوية لمنع النباتات المصاحبة. يستخدم الدم الضأن.

إعداد

وينبغي أن ينظر إلى مؤشرات لإعداد آجار قاعدة لاستخدامها. هم على الجزء الخلفي من حزمة المجففة المتوسطة. يصفون عادةً مقدار الوزن الذي يجب إعداده لإعداد لتر واحد من وسط الثقافة.

في المختبر ، يمكنك إعداد المقدار اللازم ، ويمكن أن يكون أكثر من لتر واحد أو أقل.

الحسابات

يتم وضع قاعدة الثلاثة لحساب مقدار ما يجب وزنه لإعداد وحدة التخزين المطلوبة. على سبيل المثال:

إذا كان من الضروري 1 لتر أن تزن 40 غرام والمعمل يتطلب 800 مل ، ويقال:

1000 مل -40 غرام

800 مل - اكس

ستكون الصيغة كما يلي:

X = 32 غرام (الكمية تزن 800 مل).

تزن وتذوب

ننتقل إلى وزن الكمية اللازمة ووضعها في fiola بالماء.

تسخن إلى حرارة معتدلة وتخلط بلطف مع حركات دوارة حتى يذوب الوسيط المجفف بالكامل ، ويترك ليغلي لمدة دقيقة واحدة.

عقم

يتم إدخال fiola في الأوتوكلاف لتعقيم الوسط عند 121 درجة مئوية لمدة 20 دقيقة.

مجموع الدم

عند مغادرة الأوتوكلاف ، يُترك للراحة حتى تتراوح درجة حرارة الوسط ما بين 56 إلى 70 درجة مئوية تقريباً لوضع الدم وتخلط حتى يصبح لون الوسط.

إذا كنت ستضيف إضافات ، فهذا هو الوقت المناسب للقيام بذلك. تخلط بعد ذلك وتخدم 20 مل لكل طبق بتري العقيمة.

يجب تنفيذ الإجراء بأكمله في غطاء تدفق الصفحي أو حول موقد بنسن.

اسمحوا الوقوف حتى تصلب والحفاظ على مقلوب في الثلاجة.

طريقة أخرى لإعداد أجار الشوكولاته دون استخدام الدم

يتم تحضير الوسط الأساسي كما هو موضح أعلاه ، ويتم إذابة الهيموغلوبين المجفف الذي يتم الحصول عليه تجاريًا وتعقيمه في الأوتوكلاف.

يُسمح لكلا المحلولين بالتبريد إلى 50 درجة مئوية ، والانضمام وإضافة الملحق. تخلط في ظروف معقمة ثم تقدم في أطباق بتري معقمة.

مراقبة الجودة

من المهم أن يتم وضع الدم في درجة الحرارة المحددة ، لأنه يعتبر مثاليًا لاستئصال خلايا الدم الحمراء وفي نفس الوقت الحفاظ على العامل الخامس الذي يكون حساسًا للحرارة.

لا ينبغي أن يكون هناك فقاعات على سطح أجار. يجب أن تحضن كل دفعة من 100 لوحة واحدة أو لوحتين في الموقد عند 37 درجة مئوية لمدة 24 ساعة للتحقق من عقمها.

للحصول على أفضل النتائج ، يجب استخدام أجار الشوكولاته بعد فترة وجيزة من التحضير.

يجب أخذ سلالات بكتيرية ضابطة في المختبر لتقييم فاعلية الوسط المحضّر حديثًا لنمو الكائنات الحية الدقيقة الرئيسية ذات الأهمية السريرية.

مراجع

  1. García P، Paredes F، Fernández del Barrio M. (1994). علم الأحياء الدقيقة السريرية العملية. جامعة قادس ، الطبعة الثانية. خدمة منشورات جامعة كاليفورنيا.
  2. Forbes B، Sahm D، Weissfeld A. (2009). التشخيص الميكروبيولوجي لبيلي وسكوت. 12 إد. الأرجنتين. Panamericana S.A Editorial.
  3. Koneman E، Allen S، Janda W، Schreckenberger P، Winn W. (2004). التشخيص الميكروبيولوجي. (الطبعة الخامسة). الأرجنتين ، التحرير البنميريكانا إس..
  4. Llanes R، Reyes A، Rodríguez C، Guzmán D، Llop A.. جدوى استخدام الوسيلة الأساسية للثقافة في GC-Biocen Agar في مختبر الأحياء الدقيقة. القس كوبانا ميد تروب,  2004؛ 56 (3): 237-238. متاح في: scielo.sld.
  5. المساهمون في ويكيبيديا. أجار الشوكولاته. ويكيبيديا ، الموسوعة الحرة. 17 ديسمبر 2018 ، 19:54 بالتوقيت العالمي. متاح في: en.wikipedia.org.