مؤسسة آجار سالمونيلا-شيجيلا ، إعداد واستخدامات
ال السالمونيلا-شيجيلا آجار يُعرف أيضًا باسم SS agar ، وهو عبارة عن وسيطة تفاضلية معتدلة وتفضيلية ، وهي مصممة خصيصًا لعزل البكتيريا المسببة للأمراض من جنس السالمونيلا والشيجيلا ، من كل من العينات البيئية والسريرية..
SS أجار لديه تكوين معقد. يتكون من مستخلص اللحوم ، الببتون ، اللاكتوز ، أملاح الصفراء ، سترات الصوديوم ، ثيوكبريتات الصوديوم ، سترات الحديديك ، أجار ، الأحمر المحايد ، الأخضر الفاتح والماء المقطر. بالنظر إلى انتقائية كبيرة ، فمن الممكن زرع عينات مع النباتات المختلطة وفيرة.
في مختبرات الأحياء المجهرية يستخدم وسط السالمونيلا - الشيجيلا على نطاق واسع للتحقيق في وجود السالمونيلا والشيجيلا في عينات من براز الإسهال ومياه الصرف الصحي ومياه الشرب والغذاء.
في بعض الأحيان يكون من الضروري استخدام مرق ما قبل التخصيب (مرق اللاكتوز) والإثراء (مرق السيليني سيتين) لاستعادة سلالات السالمونيلا.
هذه الخطوات مطلوبة عندما يشتبه في وجود السالمونيلا بكمية منخفضة للغاية ، أو عندما تتم إساءة معاملة الإجهاد من خلال عمليات نموذجية للإنتاج الصناعي ، وخاصة الأطعمة المصنعة. يُنصح أيضًا بإثراء عينات البراز من المرضى الذين عولجوا بالمضادات الحيوية.
في وقت لاحق ، يمكن زرع مرق المخصب على أجار السالمونيلا-شيجيلا وغيرها من الوسائط المماثلة ، مثل أزيل الزيلوز ، وأكسيد السيلوكسان ليسين (XLD) وإيكارتن آجار المعوي (HE).
مؤشر
- 1 مؤسسة
- 1.1 القوة الغذائية
- 1.2 الاتساق
- 1.3 انتقائي
- 1.4 التفاضلية
- 2 إعداد
- 3 استخدام
- 4 قيود
- 5 مراقبة الجودة
- 6 المراجع
مؤسسة
لكل مكون من مكونات ثقافة السلمونيلا - الشيجيلا وظيفة محددة ، ويمنحها الخليط ككل الخصائص التي تميزه.
قوة مغذية
يوفر مستخلص اللحوم والببتون (الكازين المهضوم والأنسجة الحيوانية) العناصر الغذائية المطلوبة (النيتروجين والكربون والفيتامينات) لتطوير الكائنات الحية الدقيقة القادرة على تحمل بقية المكونات..
اتساق
أجار آجار هي المسؤولة عن توفير الاتساق الصلب إلى المتوسط.
انتقائي
هذه الوسيلة انتقائية للغاية لأنها تحتوي على أملاح الصفراء ، سترات الصوديوم وخضراء زاهية. وبالتالي ، فإنه يمنع نمو جميع البكتيريا إيجابية الجرام ومعظم عصيات سلبية الجرام ، بما في ذلك بعض القولونيات.
في حين أن بكتيريا جنس السالمونيلا وبعض سلالات Shigella تدعم هذه المركبات.
في المقام الأول ، جنس السالمونيلا مقاوم جدًا للأملاح الصفراوية ، لدرجة أنها قادرة على العيش في المرارة لبعض المرضى الذين يتحركون باستمرار للبكتيريا من خلال البراز.
الفارق
اللاكتوز هو الكربوهيدرات المخمرة التي تساعد على تمييز سلالات تخمر اللاكتوز عن السلالات غير المخمرة. يتضح من هذه الخاصية وجود مؤشر الرقم الهيدروجيني ، والذي في هذه الوسيلة أحمر من الفينول.
تعطي سلالات التخمر اللاكتوز مستعمرات حمراء ، في حين أن السلالات غير المخمرة لا لون لها. هذه الخاصية مهمة ، لأن السالمونيلا والشيجيلا لا تخمر اللاكتوز.
من ناحية أخرى ، تحتوي هذه الوسيلة على ثيوسلفات الصوديوم كمصدر للكبريت والسترات الحديديك كمصدر للحديد. كلا المركّبات قادران على تمييز البكتيريا القادرة على إنتاج كبريتيد الهيدروجين. هذه تتفاعل لتشكيل أسود راسب من كبريتيد الحديديك غير قابلة للذوبان وضوحا.
تحتوي هذه الخاصية على بعض سلالات جنس السالمونيلا. عادة مستعمراتهم عديمة اللون مع وجود نقطة سوداء في وسطها. ما تبقى من سمك السلمونيل لا تنتج ح2S وتطوير مستعمرات عديمة اللون.
من ناحية أخرى ، مستعمرات جنس Shigella عديمة اللون دون سواد.
إعداد
هذا يعني بسيط جدا للتحضير.
تزن 63 غرام من الوسط التجاري المجفف وتذوب في لتر واحد من الماء المقطر. تسخين الحل ويقلب. يمكن أن يصل الخليط إلى درجة الغليان لمدة تصل إلى دقائق.
هذه الوسيلة لا ينبغي أن الأوتوكلاف. بعد حلها ، يتم تقديمها مباشرة على ألواح معقمة مفردة أو مزدوجة.
عند التصلب ، يتم ترتيبها بطريقة مقلوبة في صانعات البلاك وتخزينها في الثلاجة (2-8 درجة مئوية) حتى يتم استخدامها.
يجب أن يكون المتوسط بعد التحضير هو pH 7.2 ± 0.2 والأحمر البرتقالي.
من المهم السماح للألواح بتبريدها قبل زرع العينات. يمكنك مباشرة زرع العينة الأصلية ، وتفريغ المواد على جزء من الآجار ، ثم من هناك استنشاق بالإرهاق.
في حالة استخدام مرق التخصيب ، تمر جزء من مرق السيلانيت وزرع مع ملعقة drigalski.
احتضان عند 37 درجة مئوية لمدة 24 ساعة في aerobiosis.
ضع في اعتبارك أن كمية الغرامات التي يجب وزنها ودرجة الحموضة النهائية للوسيط يمكن أن تختلف من منزل تجاري إلى آخر. لوحة القاعدة من المتوسط دائما يجلب مؤشرات لإعداده.
استعمال
يستخدم بشكل متكرر في تحليل ثقافات البراز وفي الدراسة الميكروبيولوجية لعينات المياه المتبقية ومياه الشرب والغذاء.
في كثير من الأحيان يتم تحضير الألواح المزدوجة ، على جانب واحد يتم وضع أجار سالمونيلا-شيجيلا وعلى الجانب الآخر أجار XLD.
القيود
-بعض سلالات Shigella لا تنمو في هذه الوسيلة. لذلك ، لا ينصح بالعزل الأولي لهذا الجنس.
-ليس كل مستعمرة واضحة مع مركز أسود يدل على السالمونيلا. يجب إجراء اختبارات كيميائية حيوية لتحديد الهوية الصحيحة ، نظرًا لأن مستعمرات بعض سلالات Proteus لا يمكن تمييزها عن تلك الموجودة في السالمونيلا..
-يجب أن يكون الوسط المجفف حذراً من التعرض للبيئة ، لأنه رطب للغاية. لذلك ، يجب أن تبقى في بيئة جافة ومغلقة جيدا. مفتوح لفترات قصيرة جدا.
-بمرور الوقت ، يمكن للأملاح الصفراوية أن تترسب ، وتشكل صورة تشبه تلك الموجودة في الأجار ، لكن هذا لا يؤثر على النتائج.
-بعض سلالات Shigella يمكن أن تخمر ببطء اللاكتوز.
مراقبة الجودة
لإثبات أن الوسيط يعمل بشكل صحيح ، من المستحسن زرع سلالات تحكم معروفة أو معتمدة ومراقبة ما إذا كان النمو يلبي الخصائص المتوقعة.
لهذا الغرض ، سلالات E. coli، Enterobacter sp، Klebsiella pneumoniae، Shigella flexneri، Salmonella typhimurium أو المعوية البرازية.
النتائج المتوقعة هي:
الإشريكية القولونية --مستعمرات محدبة الوردي.
Enterobacter و Klebsiella- مستعمرات كبيرة و mucoid أحمر أو وردي.
Shigella flexneri --مستعمرات واضحة أو عديمة اللون.
السالمونيلا التيفيموريوم - مستعمرات عديمة اللون مع مركز أسود.
المعوية البرازية-- تثبيط كلي.
مراجع
- مختبرات ديفكو فرانسيسكو سوريجويزو. السالمونيلا-شيجيلا آجار. 2009. متاح في: f-soria.es
- مختبر BD. BD Salmonella-Shigella Agar. 2013. متوفر في: bd.com
- مختبرات بريطانيا. سالمونيلا-شيجيلا آجار. 2015. متوفر في: britanialab.com
- تشخيصات Valtek. السالمونيلا - Shigella Agar (SS Agar) .2010. متاح في: andinamedica.com
- Forbes B، Sahm D، Weissfeld A. (2009). التشخيص الميكروبيولوجي لبيلي وسكوت. 12 إد. افتتاحية Panamericana S.A. الأرجنتين.
- Koneman E، Allen S، Janda W، Schreckenberger P، Winn W. (2004). التشخيص الميكروبيولوجي. 5th ed. افتتاحية Panamericana S.A. الأرجنتين.