مؤسسة آجار TCBS ، إعداد واستخدام

ال أجار TCBS هي وسيلة ثقافة صلبة انتقائية وتفضيلية ، وتستخدم لعزل وثقافة بكتيريا Vibrio ، على وجه الخصوص ضمة الكوليرا ، V. vulnificus و خامسا parhaemolyticus كما مسببات الأمراض الرئيسية لهذا الجنس.

TCBS في اختصار يعني ثيوسلفات سترات الصفراء السكروز. وكما هو معروف هذا أجار كوسيلة انتقائية ل Vibrios. تم إنشاء الصيغة الأصلية بواسطة Nakanishi وتم تعديلها لاحقًا بواسطة Kobayashi.

يتكون من مستخلص الخميرة ، بيبتون ، تريبتين ، سترات الصوديوم ، ثيوكبريتات الصوديوم ، ثور الصوديوم ، سكروز ، كلوريد الصوديوم ، سترات الحديديك ، بروموثيمول أزرق ، ثيمول أزرق وأجار.

يسمح هذا التكوين بتطوير مناسب لأنواع الضمة من عينات المياه والبراز والعينات الغذائية ؛ باستثناء ل Vibrio hollisae, هذا لا ينمو في هذه الوسيلة. بالإضافة إلى ذلك ، فإن وسط TCBS قادر على تثبيط نمو البكتيريا المصاحبة الأخرى ، وخاصة القولونيات.

بسبب مشاكل الجهاز الهضمي وخارج الأمعاء التي تنتجها بعض الأنواع من جنس Vibrio ، فإن تشخيصها مهم للغاية. يصاب الإنسان بشكل رئيسي باستهلاك الأطعمة البحرية النيئة أو غير المطهية جيدًا أو بالمياه الملوثة ، ولكن أيضًا من خلال إصابة الجروح.

لهذا السبب ، يجب أن تشمل المختبرات السريرية أجار TCBS في دراسة الثقافات البراز من عينات البراز السائل ، وخاصة مع ظهور ماء الأرز. خاصة إذا كان المريض قد أبلغ عن اتصاله بمياه البحر أو تناوله للمأكولات البحرية أو السمك.

مؤشر

• 1 مؤسسة
• 2 إعداد
• 3 استخدام
• 4 البذور
• 5 القيد
• 6 مراقبة الجودة
• 7 المراجع

مؤسسة

خلاصة الخميرة ، بيبتون اللحم ، والتريبتين هي المصدر الغذائي لهذه الوسيلة. ومع ذلك ، TCBS أجار هو وسيلة غير مضياف لمعظم البكتيريا.

وتعطى انتقائية عالية من خلال إضافة سترات الصوديوم وثور الصفراء. وكلاهما عامل تثبيطي يوفر أيضًا درجة الحموضة القلوية إلى الوسط ، مما يحد من نمو النباتات المصاحبة ويفضل نمو ضد الكوليرا, بين الأنواع الأخرى. تجدر الإشارة إلى أن ضمة الكوليرا حساس جدا لحرقة.

من جانبها ، أرصدة كلوريد الصوديوم osmotically إلى المتوسط. بالإضافة إلى ذلك ، نظرًا لأن تركيزه مرتفع ، فإنه يعمل أيضًا كعامل تثبيطي ، مما يؤدي إلى نمو البكتيريا المحبة للهالوفيليك.

السكروز هو السكر المخمر الذي يعطي مع مؤشرات الرقم الهيدروجيني الزرقاء للبروموثيمول والأزرق الثيمول الطابع التفاضلي للوسط. لهذا السبب ، مع هذا يعني أنه من الممكن التمييز بين سلالات تخمير السكروز والسلالات غير المخمرة.

تتطور مستعمرات سلالات تخمير السكروز بلون أصفر وستتحول الوسط من الأخضر إلى الأصفر بسبب إنتاج الأحماض. ينمو غير المخمرات شفافة ويظل الوسيط اللون الأصلي (الأخضر).

وبالمثل ، تحتوي هذه الوسيلة على ثيوسلفات الصوديوم كمصدر للكبريت وسترات الحديديك كعامل كشف. كلاهما يظهر البكتيريا القادرة على إنتاج كبريتيد الهيدروجين (غاز عديم اللون). ح₂تتشكل S من الثيوسلفات وفي وقت لاحق تتفاعل مع السترات الحديديك على شكل رواسب سوداء مرئية.

أخيرًا ، أجار هو ما يعطي التماسك القوي للوسيط.

إعداد

تزن 89 غرام من المتوسط ​​المجفف وتذوب في لتر واحد من الماء المقطر. مساعدة في حل عن طريق التسخين والإثارة المتكررة. يمكن غلي الخليط لمدة دقيقتين.

هذا الوسيط لا الأوتوكلاف. بعد حلها ، يتم تقديمها مباشرة على أطباق معقمة. عند التصلب ، يتم ترتيبها بطريقة مقلوبة في صانعات البلاك وتخزينها في الثلاجة (2-8 درجة مئوية) حتى يتم استخدامها.

يجب أن يكون المتوسط ​​بعد التحضير عند درجة الحموضة 8.6 ± 0.2.

لون الوسط المجفف هو البيج الفاتح أو البيج المخضر ، ولون الوسط هو لون الغابة أخضر أو ​​أخضر مزرق.

من المهم أن تترك اللوحات هدأ قبل بذر العينات.

استعمال

العينة الأكثر شيوعًا لعزل Vibrios هي البراز الإسهال.

يجب نقل عينات البراز إذا لم يكن من الممكن وضعها مباشرة في الوسط الانتقائي ، في وسط كاري بلير.

لزيادة حساسية الثقافة ، يمكن تمرير البراز من خلال الماء الببتوني عند درجة الحموضة 8.4 كوسيلة للإثراء لمدة 8 ساعات كحد أقصى ، ومن هناك يتم زراعتها إلى وسط TCBS..

يجب أيضًا أن يؤخذ في الاعتبار أن بعض سلالات Vibrios يمكن أن تسبب تسمم الدم في المرضى الذين يعانون من كبت المناعة ، بحيث يمكن عزلهم عن ثقافات الدم. وبالمثل ، يمكن تحليل عينات من الماء والغذاء من البحر عندما يكون هناك تفشي وبائي لمرض الكوليرا.

زرعت

يجب أن يكون اللقاح الخاص بالعينة قيد الدراسة بارزًا ، ويتم البذر بطريقة الاستنشاق بالإرهاق. يتم تحضين الأطباق عند 37 درجة مئوية لمدة 24 ساعة في الأيروبيوسيس.

المستعمرات المفترضة لل ضمة الكوليرا إنها متوسطة الحجم ، ناعمة ، غير شفافة ، ذات حواف رقيقة وأصفر لأنها تخمر السكروز..

بطريقة مماثلة ، فإن الأنواع من خامسا alginolyticus, خامسا fluvialis, V. hareyi، V. cincinnatiensis، V. furnissii، V. metschnikovii وبعض V. vulnificus. الأنواع الأخرى من Vibrios هامة سريرياً خامسا parhaemolyticus لا تخمر السكروز ، وتطوير مستعمرات الزيتون الأخضر.

من ناحية أخرى ، يجب أن نضع في اعتبارنا أن بعض سلالات Aeromonas و Plesiomonas التي هي oxidase (+) يمكن أن تنمو في هذه الوسيلة ، مستعمرات صفراء نامية يمكن أن تربك الطبيب. في حين أن بعض سلالات Pseudomonas أيضا أوكسيديز (+) تنمو كما المستعمرات الخضراء كذلك خامسا parhaemolyticus.

تحديد

يجب عدم إجراء اختبار أوكسيديز الإيجابي للجنس Vibrio أبدًا من المستعمرات التي تم الحصول عليها من أجار TCBS ، لأن النتيجة التي تم الحصول عليها ستكون سلبية سالبة. تتداخل المركبات في الوسط بقوة في هذا الاختبار. لذلك ، ينبغي أن يتم ذلك من الثقافات الفرعية على آجار الدم.

مراقبة الجودة

لإثبات أن الوسيط في حالة جيدة ، من المستحسن زرع سلالات تحكم معروفة أو معتمدة ومراقبة ما إذا كان النمو يلبي الخصائص المتوقعة.

لهذا ، سلالات من:

-ضمة الكوليرا - نمو مرض (المستعمرات الصفراء ، الحدود الشفافة).

-Vibrio parhaemolyticus - نمو مرض (مستعمرة ذات مركز أخضر وحدود شفافة).

-الضمة الغينية ATCC 17749 - نمو مرض (المستعمرات الصفراء مع هالات من نفس اللون حول المستعمرة).

-المعوية البرازية ATCC 29212 - تثبيط كلي أو جزئي (مستعمرات صغيرة صفراء أو شفافة).

-الزائفة الزنجارية ATCC 27853- تثبيط جزئي أو كلي (مستعمرات زرقاء).

-الإشريكية القولونية ATCC 25922 - تم تثبيته تمامًا.

-بروتيوس ميرابيليس ATCC 43071 - تثبيط كلي أو جزئي. (مستعمرات صغيرة مركز حافة شفافة خضراء).

حضانة وسيط غير مخصب لا ينبغي أن يكون التغيير.

مراجع

1. مختبرات ديفكو فرانسيسكو سوريجويزو. أجار TCBS. 2009. متاح في: f-soria.es
2. مختبر BD. BD. TCBS Agar 2003. Available on: bd.com
3. مختبرات بريطانيا. TCBS المتوسطة. 2015. متوفر في: britanialab.com
4. مختبرات أكوميديا TCBS أجار. 2016. متوفر في: foodsafety.neogen.com
5. Forbes B، Sahm D، Weissfeld A. (2009). التشخيص الميكروبيولوجي لبيلي وسكوت. 12 إد. افتتاحية Panamericana S.A. الأرجنتين.
6. Koneman E، Allen S، Janda W، Schreckenberger P، Winn W. (2004). التشخيص الميكروبيولوجي. 5th ed. افتتاحية Panamericana S.A. الأرجنتين.