مؤسسة آجار ثاير مارتن ، إعداد واستخدامات

ال ثاير مارتن آجار بل هو وسيلة قوية للغاية مغذية وانتقائية لعزل النيسرية السحائية والنيسرية البنية. كلاهما يعرف باسم النيسرية الممرضة أو المهمة سريريًا.

واحدة من أهم الميزات الخاصة لثائر مارتن آجار هو محتواه العالي من المكملات الغذائية. هذه الخاصية لا غنى عنها ، لأن النيسريين يطالبون بالكائنات الحية الدقيقة من الناحية التغذوية وبالتالي لا ينموون في وسائل الإعلام المشتركة.

من ناحية أخرى ، نظرًا لوجود هذه الكائنات الحية الدقيقة في المناطق غير المعقمة ، فإن إضافة مثبطات تعوق نمو النباتات المصاحبة ضرورية ، دون التأثير على تطور جنس النيسرية..

يتكون هذا الآجار من أجار أساس GC ، الهيموغلوبين ، المكملات الغذائية الإضافية ومجموعة معقدة من المواد المثبطة (المضادات الحيوية والفطريات). المنازل التجارية تبيع كل من الملاحق بشكل منفصل.

تعتمد العينة المراد زراعتها في هذه الوسيلة على الكائنات الحية الدقيقة التي يتم البحث عنها. إلى النيسرية السيلانية العينات المثالية هي إفرازات المهبل والإحليل. بينما ل النيسرية السحائية العينات الأكثر استخدامًا هي إفرازات CSF والبلعوم والبلعوم الأنفي.

مؤشر

• 1 مؤسسة
  • 1.1 أجار قاعدة GC
  • 1.2 الهيموغلوبين
  • 1.3 ملحق التخصيب
  • 1.4 مثبطات
• 2 إعداد
  • 2.1 الأصل ثاير مارتن آجار
  • 2.2 تعديل آجار ثاير مارتن
• 3 استخدام
• 4 مراقبة الجودة
• 5 قيود
• 6 المراجع

مؤسسة

النيسري هي كائنات دقيقة تصنف على أنها مزعجة وبالتالي فإن عزلتها أمر صعب. لهذا السبب ، يعد Thayer Martín وسيطًا معقدًا ويؤدي كل عنصر من مكوناته وظيفة موضحة أدناه:

GC أجار الأساسية

GC agar يحتوي على الببتون البروتيني ، نشا الذرة ، كلوريد الصوديوم ، فوسفات ثنائي البوتاسيوم ، فوسفات أحادي البوتاسيوم وأجار أجار. مكوناته توفر العناصر الغذائية الأساسية للتنمية الميكروبية ، تحييد الأحماض الدهنية السامة ، وتسهم في الحفاظ على التوازن الاسموزي ، وتحديد درجة الحموضة وتوفير اتساق قوي للبيئة.

الهيموغلوبين

يوفر الهيموغلوبين العوامل V و X (النيكوتيناميد الأدينين دينوكليوتيد NAD والهيمين ، على التوالي). لذلك ، في هذه البيئة ، تنمو أنواع المستدمية أيضًا. يمكن الحصول على الهيموغلوبين تجاريًا في صورة مجففة أو يمكن إضافة دم بقري طازج منزوع الدهن إلى الوسط.

ملحق التخصيب

من ناحية أخرى ، يجب إضافة ملحق التخصيب إلى وسط Thayer-Martin ، لأن العناصر الغذائية الموجودة في أجار الأساس ليست كافية لمتطلبات جنس النيسرية..

يُسمى ملحق التخصيب الأكثر استخدامًا isovitalex. أنه يحتوي على الجلوتامين ، الأدينين ، NAD ، كاربوكسيلاز ، جوانين ، نترات الحديديك ، حامض البنزويك الأميني ، فيتامين ب 12 ، الثيامين والجلوكوز. كل هذه المركبات ضرورية للتطوير السليم للنيسرية الممرضة.

مثبطات

لأنه وسيلة مغذية للغاية ، يجب استخدام مثبطات لمنع نمو الكائنات الحية الدقيقة من النباتات المعتادة في المنطقة ، وبالتالي يفضل عزل جنس النيسرية..

يتكون مركب المانع من فانكومايسين وكوليستين ونيستاتين. يمنع الفانكومايسين نمو البكتيريا إيجابية الجرام ، ويمنع الكوليستين تطور البكتيريا سالبة الجرام مثل السودوموناس وبعض النيسرية الضارية ، والنيستاتين يعمل على الخمائر مثل المبيضات البيض.

ومع ذلك ، ثم تم تعديل ثاير مارتن آجار. وتألفت التغييرات في إضافة تريميثوبريم ، وزيادة كمية أجار وإضافة الجلوكوز الزائد. هذه التغييرات تحسنت بشكل ملحوظ استرداد أنواع النيسرية البنية.

تجدر الإشارة إلى أن تريميثوبريم يمنع نمو جنس البروتيوس وما يترتب على ذلك من تكوين حشود. بهذا المعنى ، فإن المضادات الحيوية هي التي توفر الطبيعة الانتقائية لثائر مارتن المتوسط.

إعداد

الأصل ثاير مارتن آجار

-جي سي آجار

تزن 8.2 غرام من وسط GC المجفف وتعلق في 100 مل. يُمزج ويُغلى المزيج لمدة دقيقة واحدة مع التحريك المتكرر للذوبان بالكامل. تعقيم الخليط في الأوتوكلاف في 121 درجة مئوية لمدة 15 دقيقة.

-2 ٪ الهيموغلوبين

تعليق 2 غرام من الهيموغلوبين المجفف في 2 أو 3 مل من الماء المقطر الساخن لتشكيل خليط موحد. أضف القليل من الماء قليلاً لإكمال حجم 100 مل. يجب أن يكون التعليق متجانسًا قبل التعقيم.

تعقيم في الأوتوكلاف لمدة 15 دقيقة.

-ملحق التخصيب

إعادة بناء الطريق التجاري مع المخفف المقدم من نفس المنزل التجاري. تخلط جيدا. سيتم تحديد كمية المادة المخففة المراد استخدامها في تعليمات المجموعة..

-ملحق تثبيط V.C.N (فانكومايسين ، كوليستين ، نيستاتين)

أعد تكوين القارورة باستخدام المادة المخففة التي يوفرها المنزل التجاري. تخلط جيدا. سيتم تحديد كمية المادة المخففة المراد استخدامها في تعليمات المجموعة..

-معد

لكل 100 مل من GC أجار المضي قدما على النحو التالي:

عندما يترك GC agar الأوتوكلاف ، دعه يبرد حتى درجة حرارة حوالي 50 درجة مئوية وإضافة 2 مل من محلول الهيموغلوبين المحضر ، 2 مل من ملحق التخصيب (isobitalex أو britalex) ، و 2 مل من ملحق تثبيط. تخلط وتخدم في أطباق بتري معقمة.

السماح للتصلب وتخزينها في الثلاجة حتى الاستخدام.

لون المتوسطة أعدت الكرز الأحمر. الرقم الهيدروجيني النهائي للوسيط هو 7.2 ± 0.2

تعديل ثاير مارتن آجار

تزن 8.2 غرام من وسط GC المجفف وتعلق في 100 مل. إضافة 1 غرام من أجار وإضافة 0.3 غرام من الجلوكوز. يُمزج ويُغلى المزيج لمدة دقيقة واحدة مع التحريك المتكرر للذوبان بالكامل. تعقيم الخليط في الأوتوكلاف في 121 درجة مئوية لمدة 15 دقيقة.

إعداد الهيموغلوبين وملحق التخصيب كما هو موضح أعلاه.

الملحق تثبيط المستخدمة هو V.C.N.T (فانكومايسين ، كوليستين ، نيستاتين ، تريميثوبريم).

-معد

المضي قدما كما هو موضح الأصلي أجار ثاير مارتن.

استعمال

ينبغي خفف ثاير مارتن آجار قبل بذر العينات. العينات شائعة الاستخدام هي إفرازات البلعوم ، إفرازات الأنف ، إفرازات المهبل ، الإحليل و / أو المستقيم و CSF..

استخدام عينات مأخوذة حديثا وجعل اللقاح قوي على أجار. تزرع العينات مباشرة عن طريق تفريغ المواد ومن ثم يتم نضوبها عن طريق النضوب على السطح.

يتم تحضين الأطباق عند درجة حرارة 35-37 درجة مئوية لمدة 24 إلى 48 ساعة في وعاء يحتوي على ميكرووفيليك (5٪ من ثاني أكسيد الكربون)₂). في نهاية فترة الحضانة ، يتم فحص الألواح في مستعمرات صغيرة ، رمادية ، وأحيانًا تشبه الغشاء المخاطي..

إجراء اختبارات الجرام والكيمياء الحيوية المؤكدة للمستعمرات المشبوهة.

مراقبة الجودة

لإجراء مراقبة الجودة في أجار ثاير مارتن ، يمكن استخدام السلالات الميكروبية التالية.

النيسرية البنية ATCC 49226 و النيسرية السحائية ATCC 13090 ؛ في كلتا السلالات يتوقع حدوث تطور مرض.

يجب أيضًا تضمين السلالات التالية: المكورات العنقودية الجلدية ATCC 14990, الإشريكية القولونية ATCC 25922, بروتيوس ميرابيليس ATCC 43071 و المبيضات البيض ATCC 10231. من المتوقع حدوث تثبيط كلي أو جزئي في هذه الوسيلة.

القيود

-يجب ألا يغيب عن البال أن البكتيريا المقاومة للمثبطات المستخدمة يمكن أن تنمو في الوسط..

-هناك سلالات من النيسرية السيلانية والتي قد تكون حساسة لتركيز فانكومايسين المستخدمة. لهذا السبب ، يوصى باستخدام أجار الشوكولاتة مع الإيزوفيتالكس بالتوازي ، ولكن بدون مثبطات.

-هناك سلالات من الخمائر المقاومة للنيستاتين التي يمكن أن تنمو في هذه الوسيلة وتتداخل مع عزل النيسرية الممرضة ، وخاصة المكورات البنية..

مراجع

1. مختبرات فالتك التشخيصية. آجار ثاير-مارتين. متوفر في: com
2. مختبرات بريطانيا. ثاير مارتن التعديل المتوسط. 2010. متاح في: britanialab.com
3. المساهمون في ويكيبيديا. ثاير آجار مارتن. ويكيبيديا ، الموسوعة الحرة. 26 أكتوبر 2017 ، 16:33 بالتوقيت العالمي. متاح في: wikipedia.org4. تم الوصول إليه في 28 فبراير 2019.
4. مختبرات بريطانيا. جي أجار. 2010. متاح في: britanialab.com.
5. مختبرات BBL ™ تخصيب متوسط ​​للكائنات الحية الدقيقة. 1999. متوفر في: bd.com
6. Forbes B، Sahm D، Weissfeld A. (2009). التشخيص الميكروبيولوجي لبيلي وسكوت. 12 إد. افتتاحية Panamericana S.A. الأرجنتين.