أساس مرق السيلانيت ، إعداد واستخدامات

ال مرق السيلانيت بل هو وسيلة ثقافة انتقائية السائل. تم تصميمه من قبل ليفسون لإثراء العينات حيث يشتبه في وجود البكتيريا المسببة للأمراض من جنس السالمونيلا..

هذه الوسيلة تلبي متطلبات الجمعية الأمريكية للصحة العامة (APHA) ، وبالتالي فهي مقبولة للتحقيق في وجود السالمونيلا في عينات البراز ، والبول ، والأطعمة السائلة أو الصلبة ، والمياه ، وغيرها..

التركيبة الكيميائية التي تمتلكها تفضل استعادة هذه الكائنات الحية الدقيقة وبالتالي تمنع نمو الآخرين. وهي سامة بشكل أساسي لمعظم البكتيريا التي تنتمي إلى عائلة Enterobacteriaceae. ومع ذلك ، فإنه يسمح أيضًا باستعادة سلالات Shigella ولا يمنع نمو Pseudomonas و Proteus..

وهو يتألف من سيلينيت هيدروجين الصوديوم اللامائي ، فوسفات الصوديوم اللامائي ، الببتونات واللاكتوز. هناك أيضًا متغير يضاف إليه السيستين ، ومن هنا يكون مرق السيلانيت - السيستين.

في الوقت الحالي ، يفضل استخدام مرق السيلينايت - السيستين ، حيث يتم الحصول على نسبة أعلى من استرداد السالمونيلا ، أي ما يعادل تلك الملاحظة مع الوسائط الانتقائية الأخرى لنفس الغرض ، مثل مرق الصوديوم Tetrathionate..

مؤشر

• 1 مؤسسة
• 2 إعداد
  • 2.1 - سيلينا
  • 2.2 - إعداد الوسيط التجاري
  • 2.3 مرق السيلانيت-سيستين البديل
• 3 الاستخدامات
• 4 البذور
• 5 مراقبة الجودة
• 6 قيود
• 7 المراجع

مؤسسة

تعمل الببتونات الموجودة في المرق كمواد مغذية للتطوير السليم للكائنات الحية الدقيقة. تستخدم سلالات السالمونيلا الببتون كمصدر للنيتروجين والفيتامينات والأحماض الأمينية.

اللاكتوز هو الكربوهيدرات القابلة للتخمير ، في حين أن سيلينيت الصوديوم هو المادة المثبطة التي تبطئ نمو البكتيريا الإيجابية الغرام ومعظم البكتيريا الموجودة في النباتات المعوية ، وخاصة من عائلة Enterobacteriaceae. فوسفات الصوديوم هو المخزن المؤقت الذي يثبت درجة الحموضة في الوسط.

في حالة متغير مرق السيلانيت الذي يحتوي على L- سيستين ، فإن هذا المركب الإضافي هو عامل اختزال يقلل من سمية السيلانيت ، مما يزيد من استعادة السالمونيلا.

إعداد

-مرق السيلانيت

إذا كان لديك مكونات الخليط ، يمكنك أن تزن:

4 غرام من سيلينيت الهيدروجين الصوديوم اللامائي.

10 غرام من فوسفات الصوديوم اللامائية.

5 غرام من peptonas.

4 غرام من اللاكتوز.

حل المركبات في 1 لتر من الماء المقطر المعقم. يمكن تسخينه قليلاً ليذوب بالكامل.

تعرض بعض المختبرات الوسيلة لمدة 10 دقائق في بخار يجيد تعقيمها ، لأنه لا ينبغي استخدام الأوتوكلاف. إذا تم تعقيم الوسيط ، يمكن تخزينه في الثلاجة حتى يتم استخدامه.

يمكن أيضًا تحضيره دون تعقيم وتقديم 10 إلى 15 مل مباشرةً من أنابيب الاختبار المعقمة.

في هذه الحالة ، يجب تركها للراحة واستخدامها على الفور. نظرًا لأن الوسيط ليس معقمًا ، فلا يمكن تخزينه في الثلاجة لاستخدامه لاحقًا.

-إعداد الوسط التجاري

في حالة توفر الوسيط التجاري ، يتم وزن 23 جم من الوسط المجفف وتذويبه في لتر واحد من الماء المقطر المعقم. دافئة لفترة وجيزة لإنهاء الذوبان. لا تعقم في الأوتوكلاف. يقدم معقم 10 أو 15 مل في أنابيب اختبار معقمة.

يجب أن يكون الرقم الهيدروجيني النهائي للوسط 7.0 7.0 0.2.

تجدر الإشارة إلى أن لون الوسط المجفف هو البيج والإعداد واضح وشفاف العنبر.

البديل مرق السيلانيت سيستين

أنه يحتوي على نفس المركبات من مرق السيلانيت ، ولكن تمت إضافة 10 ملغ من السيستين. بقية الإجراء هو نفسه كما هو موضح أعلاه.

تطبيقات

هذه الوسيلة خاصة لاستخدامها في الدراسات الوبائية ، في الحالات التي لا يكون فيها المرض في مرحلته الحادة ، أو المرضى الذين يعانون من أعراض أو ناقلات صحية.

عادة ما يكون عزل جنس السالمونيلا أمرًا صعبًا ، حيث يوجد عادةً ملوثًا للعينات بطريقة نادرة. أن تكون الكميات الصغيرة متداخلة بسهولة من خلال نمو الأجناس البكتيرية الأخرى الموجودة بكمية أكبر.

من ناحية أخرى ، غالبًا ما تتعرض المواد الخام التي تتم معالجتها بالأطعمة المصنعة للحرارة ولعمليات الجفاف واستخدام المطهرات والإشعاع والمواد الحافظة ، من بين أشياء أخرى..

لذلك ، يتم إساءة معاملة السالمونيلا الموجودة في المواد الخام من خلال تقديم المنتج إلى العمليات الصناعية المذكورة أعلاه. وبالمثل ، في حالة العينات السريرية مثل البراز ، قد تكون السلالات ضعيفة إذا كانت تأتي من مرضى عولجوا بالمضادات الحيوية..

لذلك ، يجب إثراء أي عينة يشتبه في وجود السالمونيلا فيها في مرق اللاكتوز ، ثم يتم تخصيبها في مرق السيلانيت لتحسين استعادتها في الوسائط الانتقائية ، مثل SS agar ، و xylose agar ، و lysine deoxycholate (XLD) ) ، معوي Hektoen agar (HE) و agar أخضر ساطع ، من بين أمور أخرى.

زرعت

للعينات البراز تأخذ 1 غرام من العينة وتعلق في أنبوب مع 10 إلى 15 مل من مرق السيلانيت. إذا كان البراز سائلاً ، خذ 1 مل وقم بتعليقه في المرق. لمسحات المستقيم ، تصريف مادة المسحة في المرق.

في عينات من الأطعمة الصلبة تأخذ 1 غرام وتعلق في مرق السيلانيت.

في الأطعمة السائلة تخلط في أجزاء متساوية مع مرق السيلانيت في تركيز مزدوج.

بالنسبة لعينات البول ، قم بطرد الطاف ، واتخاذ جميع الرواسب وتعليقه في مرق السيلانيت..

يتم تحضين المرق عند 37 درجة مئوية لمدة 24 ساعة من الحضانة. ويتضح نمو البكتيريا عن طريق التعكر. يمكن أيضًا تضمين أنبوب إضافي لكل عينة في الحضانة عند 42 درجة مئوية. بعد ذلك ، زرعت وسائل الإعلام الصلبة انتقائية من مرق السيلانيت.

مراقبة الجودة

للسيطرة على العقم ، يتم تحضين مرق السيلانيت من كل دفعة دون تلقيح عند 37 درجة مئوية لمدة 24 ساعة. من المتوقع عدم وجود تعكر ، أو تغيير في لون الوسط.

من أجل التحكم في حسن سير الوسط ، يمكن استخدام سلالات معروفة ، مثل:

السالمونيلا المعوية ATCC 13076, السالمونيلا التيفيموريوم ATCC 14028,  السالمونيلا الكوليرا ATCC 12011, الإشريكية القولونية ATCC 25922 و بروتيوس ميرابيليس ATCC 43071.

النتائج المتوقعة هي:

• بالنسبة للسلالات البكتيرية الثلاثة الأولى ، يجب أن يكون النمو مرضياً.
• إلى الإشريكية القولونية تثبيط جزئي.
• ل Proteus نمو معتدل.

القيود

مرق السيلانيت المتوسط ​​سام للجلد البشري ، لذلك يجب تجنب الاتصال المباشر.

مراجع

1. Flores-Abuxapqui J و Puc-Franco M و Heredia-Navarrete M و Vivas-Rosel M و Franco-Monsreal J. مقارنة بين وسائط الاستزراع في سيلينيت الصوديوم ورباعيونيت الصوديوم ، وكلاهما تم حضنه عند 37 درجة مئوية و 42 درجة مئوية ل عزلة السالمونيلا البراز من البراز الناقلون. القس بيوميد 2003؛ 14 (4): 215-220
2. مختبرات بريطانيا. سيلينيتو كالدو. 2015. متوفر في: britanialab.com
3. مختبرات نيوجين مرق سيلينيتو متاح في: foodsafety.neogen.com
4. González -Pedraza J، Pereira -Sanandres N، Soto -Valela Z، Hernández -Aguirre E، Villarreal- Camacho J. Microbiological العزلة السالمونيلا النيابة. والأدوات الجزيئية للكشف عنها. الصحة ، بارانكويلا 2014؛ 30 (1): 73-94. متاح من: http://www.scielo.org.
5. Forbes B، Sahm D، Weissfeld A. (2009). التشخيص الميكروبيولوجي لبيلي وسكوت. 12 إد. افتتاحية Panamericana S.A. الأرجنتين.