ما هو تلطيخ بسيط؟ أهم الميزات

ال تلطيخ بسيط هو عملية تلطيخ سريعة وبسيطة يتم فيها استخدام صبغة واحدة ، ولهذا السبب يطلق عليها البساطة. وهي تستخدم أساسا لتحديد التشكل وتنظيم الخلايا الموجودة في العينة.

بطبيعة الحال ، لا تحتوي الخلايا على لون ، لذلك من الضروري جعلها مرئية بطريقة أو بأخرى عندما يتم رصدها في المجهر.

من المهم التأكيد على أن الأصباغ المستخدمة في تلطيخ بسيط يجب أن تكون أساسية مع شحنة موجبة (الموجبة) ، حتى يتمكنوا من ربط جدار الخلية و السيتوبلازم تلقائيًا.

هذه الهياكل الخلوية سالبة الشحنة. لهذا السبب تنجذب الصبغة ، المشحونة إيجابياً ، إلى الخلايا وتربطها تلقائيًا. وبالتالي ، فإن جميع الخلايا الموجودة في عينة ملونة بسرعة.

الأصباغ المستخدمة في تلطيخ بسيط

هناك العديد من الأصباغ الأساسية التي يمكن استخدامها في مختبر الأحياء الدقيقة. الأكثر استخداما هي:

- الميثيلين الأزرق.

- البنفسجي الكريستال.

- الملكيت الأخضر.

- fuchsin الأساسية.

كل هذه الأصباغ تعمل بشكل جيد في البكتيريا لأنها تحمل أيونات ملونة (موجبة) موجبة الشحنة (chromophores).

الأوقات تلطيخ لمعظم هذه الأصباغ هي قصيرة نسبيا. وهي تتراوح عادة من 30 ثانية إلى دقيقتين ، اعتمادًا على تقارب الصبغة.

من المهم أن تضع في اعتبارك أنه قبل صباغة عينة عن طريق تلطيخ بسيط ، يجب تمديدها وتثبيتها على الشريحة الزجاجية (الشريحة) ؛ العينة الممتدة والثابتة تسمى اللطاخة.

الخطوات 6 لأداء تلطيخ بسيط

الخطوة 1

ضع الشريحة على رف تلطيخ ثم ضع الصبغة المطلوبة. اترك الوقت المناسب.

عادةً ، يستغرق التلطيخ البسيط بضع ثوانٍ أو بضع دقائق ، اعتمادًا على التلوين المستخدم.

ملاحظة

في هذه الخطوة ، من المهم عدم تجاوز الوقت الموصى به للصبغة المستخدمة ، حيث يمكن أن تتشكل البلورات على الورقة ، مما ينتج عنه ما يعرف باسم "القطع الأثرية" التي تشوه مورفولوجيا الخلايا.

الخطوة 2

اغسل بعناية مسحة الشريحة بالماء المقطر من زجاجة ، أو أيضًا بماء الصنبور الذي يتدفق ببطء ، حتى يصبح جريان المياه شفافًا. هذا عادة ما يستغرق 5 إلى 10 ثوان.

ملاحظة

لا تطبق تيار الماء مباشرة على اللطاخ ، لمنع قوة نفسه من إتلاف العينة.

إذا لم يكن لديك ماء مقطر ، يمكنك استخدام ماء الصنبور دون أي مشكلة لأنه لن يؤثر على نتيجة التلطيخ.

الخطوة 3

قم بتجفيف الشريحة باستخدام مناشف ورقية ماصة في اتجاه واحد ودون فرك. تأكد من أن الجزء السفلي من الشريحة نظيف.

الخطوة 4

مراقبة مسحة ملطخة في المجهر. ابدأ بالأهداف البعيدة لتحديد المنطقة التي تريد ملاحظتها بمزيد من التفصيل بشكل صحيح. تغيير الهدف للحصول على أقرب وأقرب إلى العينة.

ملاحظة

لاستخدام العدسة بأعلى تكبير (عادة 100X) ، يجب استخدام زيت الغمر ، حيث يساعد الضوء على اختراق أفضل وتكون الصورة أكثر وضوحًا. ليس من الضروري استخدام ساترة.

الخطوة 5

أخيرًا ، تجاهل جميع العينات في حاوية مناسبة تحمل علامة "biohazard" بشكل صحيح.

مراجع

1. (2001). التطبيقات الميكروبيولوجية: دليل المختبر في علم الأحياء الدقيقة العام (8 ^عشر أد.). شركات ماكجرو هيل.
2. هاريشا ، س. (2006). مقدمة في التكنولوجيا الحيوية العملية (1^شارع). جدار الحماية وسائل الإعلام.
3. Moyes، R. B.، Reynolds، J.، & Breakwell، D. P. (2009). تلطيخ أولي للبكتيريا: بقع بسيطة. البروتوكولات الحالية في علم الأحياء الدقيقة, (ملحق 15) ، 1-5.
4. Pommerville، J. (2013). مختبر الكامو أساسيات علم الأحياء الدقيقة (10^عشر). جونز وبارتليت التعلم.
5. بريسكوت ، هـ (2002). تمارين مختبر في علم الأحياء الدقيقة (5 ^عشر). شركات ماكجرو هيل.
6. سومبالي ، جي. ومهروترا ، ر. (2009). مبادئ علم الأحياء الدقيقة (1^شارع). تاتا ماكجرو هيل التعليم.