مؤسسة آجار CLED واستخداماتها وإعدادها

ال CLED أجار (Cystine-Lactose-Electrolytes-Deficiency) هي وسيلة استنباتية صلبة تفاضلية ، تستخدم لتشخيص التهابات الجهاز البولي. تم تصميم تركيبة المستنبت للنمو الجيد لمسببات الأمراض البولية وهي مثالية لتقدير وحدات تشكيل المستعمرة (CFU).

وسط ثقافة CLED غير انتقائي ، نظرًا لأن الكائنات الحية الدقيقة سالبة الجرام وأيضًا إيجابية الجرام يمكن أن تنمو فيه. ولكن هذه ليست مشكلة ، لأن معظم التهابات المسالك البولية سببها نوع واحد من الكائنات الحية الدقيقة.

في حالة حدوث عدوى متعددة الميكروبات ، يمكن الحصول على 2 أو 3 أنواع مختلفة من البكتيريا ، ولكنها نادرة جدًا وغالبًا ما تكون ملوثة..

من بين البكتيريا سالبة الجرام التي يمكن أن تنمو في هذه الوسيلة توجد العصيات التي تنتمي إلى الأسرة المعوية وغيرها من العصيات المعوية ، حيث يتم عزل مسببات الأمراض في كثير من الأحيان في عينات البول ، ما يلي: الإشريكية القولونية ، الكلبسيلة الرئوية ، بروتيوس ميرابيليس, مورغانيلا مورغاني, الزائفة الزنجارية, من بين أمور أخرى.

وبالمثل ، من بين البكتيريا إيجابية الجرام التي يمكن أن تنمو في هذه الوسيلة هي المكورات العنقودية الذهبية ، المكورات العنقودية الذهبية ، المعوية البرازية ، المكورات العقدية agalactiae ، Corynebacterium sp ، Lactobacillus sp ويمكن أن تنمو الخميرة ، مثل المجمع المبيضات البيض.

ومع ذلك ، بسبب التركيب الكيميائي للوسط ، فإنه لا يسمح بنمو بعض مسببات الأمراض البولي التناسلي ، مثل النيسرية البنية, الغاردنريلة المهبلية, من بين أمور أخرى.

مؤشر

• 1 مؤسسة أجار CLED
• 2 تأسيس أجار CLED (بيفيس)
• 3 الاستخدامات
  • 3.1 زرع عينات البول
  • 3.2 التفسير
  • 3.3 تحديد الهوية
• 4 إعداد
• 5 المراجع

أساس أجار CLED

يحتوي مستخلص CLED الوسيط على مستخلص لحم مصدر الطاقة ، وكازين هيدروليزيت البنكرياس وهيدرولاتيز الجيلاتين. أنها توفر العناصر الغذائية لتطوير البكتيريا المتساهلة.

كما أنه يحتوي على السيستين ، وهو حمض أميني يسمح بنمو القولونيات ، يمكن تمييزه بصغر حجمه.

وبالمثل ، يحتوي اللاكتوز على كربوهيدرات قابلة للتخمير ، ولهذا السبب فإن هذه الوسيلة مختلفة. القدرة على تمييز البكتيريا المخمرة عن اللاكتوز غير المخمر.

تحول البكتيريا المخمرة درجة الحموضة في الوسط عن طريق إنتاج الأحماض ، وتطوير المستعمرات الصفراء ، في حين أن البكتيريا غير المخمرة لا تولد تغييرات في الوسط ، وبالتالي فإنها تأخذ تلوين الآجار الأصلي ، اللون الأخضر.

تم الكشف عن تفاعل التخمر بفضل وجود مؤشر الأس الهيدروجيني ، والذي يكون في هذا الوسط أزرق البروموثيمول.

من ناحية أخرى ، فإن تركيز الإلكتروليت المنخفض في الوسط يمنع النمو الغازي النموذجي للجنس بروتيوس, دعا تأثير الحشد. هذا يولد ميزة فيما يتعلق بوسائل أخرى ، لأنه يسمح عد UFCs ، بما في ذلك إذا كان جنس Proteus موجود.

ومع ذلك ، فإن انخفاض تركيز الشوارد يمنع نمو بعض أنواع الجنس الشيجلا, كونه هذا عيب فيما يتعلق بوسائل أخرى.

أساس CLED آجار (بيفيس)

يوجد تغيير أو تعديل لهذه الوسيلة بواسطة Bevis ، الذي قام بدمج تركيبة حمض fuchsin الأصلي (مؤشر Andrade) في التكوين الأصلي. وهو يعمل جنبا إلى جنب مع الأزرق البروموثيمول للتمييز بين التخمير من البكتيريا غير المخمرة.

الفرق بين التقليدية والوسط المعدل هو اللون الذي اعتمدته المستعمرات. في حالة البكتيريا المخمرة لللاكتوز ، تكتسب المستعمرات لونًا برتقاليًا محمرًا مع هالة وردية أو حمراء ، بينما تكون البكتريا غير المخمرة رمادية مزرقة..

تطبيقات

يستخدم CLED أجار حصرا لزرع عينات البول. استخدام هذه الوسيلة شائع بشكل خاص في المختبرات الأوروبية ، بينما في أمريكا أقل استخدامًا.

يجب أن تفي مجموعة العينة بمعلمات معينة للحصول على نتائج موثوقة ، بما في ذلك:

• عدم تناول المضادات الحيوية قبل أخذ العينة.
• يفضل أخذ البول من الساعة الأولى من الصباح ، لأنه أكثر تركيزًا ، عندما لا يكون من الممكن أخذ العينات بطرق مجتاحة.
• اغسل الأعضاء التناسلية تمامًا قبل أخذ العينة.
• تجاهل تيار التبول الأول ثم ضع الحاوية.
• جمع ما بين 25 إلى 30 مل من البول في حاويات معقم المسمى.
• خذ على الفور إلى المختبر محاط بالجليد.
• يجب معالجتها قبل ساعتين من الانبعاث أو التبريد عند 4 درجات مئوية لمدة أقصاها 24 ساعة.

زرع عينات البول

يجب تخفيف عينة البول 1:50.

للتخفيف ، ضع 0.5 مل من بول المريض وتخفف مع 24.5 مل من محلول فسيولوجي معقم.

قياس 0.1 مل من البول المخفف وزرع في السطح مع ملعقة drigalski على وسيط CLED. هذه هي طريقة البذر المشار إليها لحساب المستعمرات. هذا هو السبب في استخدامه في عينات البول ، حيث يجب التعبير عن النتائج بوحدة CFU / ml.

لتقدير المستعمرات التي تم الحصول عليها ، تابع ما يلي: عد مستعمرات اللوحة واضربها في 10 ثم في 50. وبهذه الطريقة تحصل على كمية CFU / مل من البول.

ترجمة

عد أكثر من 100،000 CFU / مل - العدوى البولية الهندية

العد أقل من 1000 CFU / مل ، لا عدوى

العد بين 1000-10000 CFU / مل - شك ، والتلوث المحتمل ، كرر أخذ العينات.

تحديد

يجب أن تكون المستعمرات التي تزرع في أجار CLED عبارة عن جرام ، واعتمادًا على الخصائص النموذجية للكائنات الحية الدقيقة التي يتم تنفيذ ثقافة فرعية معينة.

على سبيل المثال ، إذا كانت عصية سلبية الغرام ، فسيتم زرعها على أجار MacConkey ، حيث يتم تأكيد تخمير اللاكتوز أو عدمه. بالإضافة إلى ذلك ، يتم إرفاق أجار مغذي لإجراء اختبار أوكسيديز.

في حال كشف الجرام عن وجود غرامي إيجابي من الجرام ، يمكن زراعته في أجار مانيتول المالح وفي أجار مغذي. في الأخير ، يتم إجراء اختبار الكاتلاز. أخيرًا ، إذا تمت ملاحظة الخمائر ، فسيتم زرعها في أجار سابورو.

تتجنب العديد من المختبرات استخدام وسيط CLED وتفضل فقط استخدام آجار الدم وماكونكي والأجار المغذي لبذر عينات البول.

إعداد

في قارورة واحدة لتر من الماء المقطر ، تذوب 36.2 غرام من أجار CLED المجفف. بعد 5 دقائق من الراحة ، قم بتسخين أجار معلق ، واخلطه باستمرار حتى الغليان لمدة دقيقة واحدة.

ثم تعقيمها في 121 درجة مئوية لمدة 15 دقيقة في الأوتوكلاف. بمجرد انتهاء الوقت ، يتم إزالته من الأوتوكلاف ويسمح لتبرد حتى تصل إلى درجة حرارة 45 درجة مئوية. يقدم بعد ذلك بين 15-20 مل في كل طبق بتري معقم.

يجب تنفيذ الإجراء الخاص بتقديم اللوحات داخل غطاء تدفق الصفحي أو أمام موقد بنسن لتجنب التلوث..

يسمح للألواح المقدمة بالتصلب ، ويتم طلبها في حامل لوحة مقلوب ومخزن في الثلاجة (2-8 درجة مئوية) حتى الاستخدام.

يجب أن يكون الرقم الهيدروجيني النهائي للوسيط المعد من 7.3 ± 0.2.

مراجع

1. توصيات لتشخيص الميكروبيولوجية من التهاب المسالك البولية. تشيل. infectol.  2001؛ 18 (1): 57-63. متاح في: scielo.org.
2. Panchi J. تحديد هوية العامل الجرثومي الذي يسبب الالتهابات البولية في المرضى الداخليين الذين يخضعون لقسطرة المثانة. 2016. العمل الجامعي للتقدم للحصول على لقب ليسانس في المختبرات السريرية. جامعة أمباتو التقنية. الإكوادور.
3. مختبرات بريطانيا. نصف CLED. متاح في: britanialab.com.
4. مختبرات رينيلاب تعليمات للاستخدام ، CLED آجار. 2013 متاح في: www.renylab.ind.br.
5. مختبرات مثقف دليل الأساسية لعلم الأحياء المجهرية. متاح في: ictsl.net.
6. Muñoz P، Cercenado E، Rodríguez-Créixems M، Díaz MD، Vicente T، Bouza E. خيار agr cled في روتين ثقافة البول. تقييم المحتملين والمقارنة. تشخيص إصابة الميكروبيول 1992؛ 15 (4): 287-90.
7. García P، Paredes F، Fernández del Barrio M. (1994). علم الأحياء الدقيقة السريرية العملية. جامعة قادس ، الطبعة الثانية. خدمة منشورات جامعة كاليفورنيا.