شارك:
مؤسسة آجار هيكتوين ، إعداد واستخدامات
ال هيكتن آجار أو معوي Hektoen أجار هو وسيلة ثقافة صلبة وانتقائية وتفضيلية. تم إنشاؤه في معهد Hektoen بواسطة King و Metzger لعزل البكتيريا المعوية للأمراض من جنس Shigella و Salmonella..
يتكون الوسط من بيبتون البروتينات ، خلاصة الخميرة ، أملاح الصفراء ، اللاكتوز ، السكروز ، ساليسين ، ثيوكبريتات الصوديوم ، كلوريد الصوديوم ، سترات الحديد ، سترات الأمونيوم ، الأزرق البروموثيمول ، حمض الفوشين والأجار. تسمح هذه التركيبة بالتمييز بين الأجناس Shigella و Salmonella عن بقية البكتيريا القادرة على النمو في هذه الوسيلة.
على الرغم من وجود وسائل أخرى لها نفس وظيفة Hektoen agar ، إلا أن هذا يمثل ميزة أكبر مقارنةً بالوسائل الأخرى ، خاصةً عندما تريد استرداد أنواع Shigella.
أنواع كلا النوعين تنتج مشاكل معوية حادة لدى البشر بسبب استهلاك الأغذية الملوثة ؛ وبالتالي فإن انتقال البراز - عن طريق الفم. هذا هو السبب في أن استخدام Hektoen agar مبين بشكل أساسي في التحليل الميكروبيولوجي لعينات البراز والغذاء..
مؤشر
- 1 مؤسسة
- 2 إعداد
- 3 استخدام
- 4 مراقبة الجودة
- 5 قيود
- 6 المراجع
مؤسسة
يحتوي Hektoen agar على الببتون وخلاصة الخميرة كمصدر للمواد الغذائية ، مما يوفر العناصر الأساسية للتنمية الميكروبية.
ومع ذلك ، فإنه يحتوي أيضًا على أملاح الصفراء التي تعمل على تثبيط نمو بعض البكتيريا ، وخاصة الجرام الإيجابي وبعض الجرام سالبة. ولهذا السبب تعتبر وسيلة انتقائية.
من ناحية أخرى ، Hektoen agar هي وسيلة تفاضلية. يتم منح هذه الخاصية من خلال وجود الكربوهيدرات القابلة للتخمير مثل اللاكتوز والسكورة والساليسين ، جنبا إلى جنب مع نظام مؤشر الرقم الهيدروجيني ، ويمثلها البروموثيمول الأزرق والحمض fuchsin..
جميع البكتيريا القادرة على النمو في هذه الوسيلة التي لا تنتمي إلى جنس السالمونيلا والشيجيلة ستطور مستعمرات السلمون أو البرتقال باستثناء جنس البروتيوس. ويرجع ذلك إلى تخمير واحد أو عدة من الكربوهيدرات الموجودة ، والتي تحمض الوسط ، مما يؤدي إلى تحول مؤشر الرقم الهيدروجيني.
من جانبها ، لا يستطيع جنس Shigella و Salmonella تخمير أي من الكربوهيدرات الموجودة ، وذلك باستخدام الببتونات فقط كمصدر للطاقة ، مما يجعل البيئة قلوية وبالتالي تكون مستعمراتها خضراء زرقاء.
أيضا في هذه الوسيلة يمكن تمييز البكتيريا القادرة على تشكيل كبريتيد الهيدروجين (غاز عديم اللون). يعمل ثيوكبريتات الصوديوم كمصدر للكبريت في حين أن سترات الحديد هي عامل الكشف. كلا المركّبات يُمكّنان من تكوين رواسب سوداء لكبريتيد الحديد الذي يثبت التفاعل.
الرواسب السوداء في وسط المستعمرة مع هالة شفافة حول يعطي مظهر عين السمكة. هذه الخاصية تشير إلى وجود جنس السالمونيلا.
أخيرًا ، يحتفظ كلوريد الصوديوم بالتوازن الاسموزي ويعطي الأجار ثباتًا ثابتًا في الوسط.
إعداد
تزن 76 غرام من المتوسط المجفف وتذوب في لتر واحد من الماء المقطر. هز الخليط بقوة واتركه يستريح لمدة 10 إلى 15 دقيقة. يمكن تسخينها وغليها ، مما يعطي حركات دوارة حتى انحلالها التام. هذا الوسيط لا يتم تعقيمه.
عندما تصل درجة الحرارة إلى حوالي 45 درجة مئوية ، يتم سكب حجم 20 مل مباشرةً في أطباق بتري العقيمة..
أجار يسمح لتصلب. في ذلك الوقت هم جاهزون للاستخدام. ينصح باستخدامها على الفور. إذا لم تكن ممكنة ، فيجب حفظها في الثلاجة حتى يتم استخدامها.
يجب إزالة الألواح في وقت مبكر من الثلاجة قبل زرعها لرفع درجة حرارة الغرفة.
يجب أن يكون الرقم الهيدروجيني للمتوسط 7.5 ± 0.2. لون الوسط المجفف أرجواني ومحضر بلون أخضر بني.
استعمال
يوصى باستخدام Hektoen agar للبحث عن بكتيريا جنس Shigella و Salmonella في عينات البراز والطعام..
تزداد بشكل كبير إمكانية عزل هذه البكتيريا إذا تم إثراء العينة سابقًا في مرق خاص ، مثل مرق السيلانيت ، مرق السيلينايت المرق ، مرق التراثيونات ، إلخ..
يجب أن يكون اللقاح قوياً وأن يتم البذر عن طريق الفتنة. يتم تحضين الأطباق عند 37 درجة مئوية لمدة 24 إلى 48 ساعة في الأيروبيوسيس.
يوصى بالاحتضان لمدة 48 ساعة لأن خصائص المستعمرات أوضح لتفسيرها وتمييزها في هذا الوقت.
مراقبة الجودة
لتنفيذ مراقبة الجودة على هذه السلالات البكتيرية المعتمدة ، يتم استخدام مثل: السالمونيلا التيفيموريوم ATCC 14028, السالمونيلا المعوية ATCC 13076, Shigella flexneri ATCC 12022 و شيجيلا سونى ATCC 25931.
النتائج المتوقعة هي التالية: السالمونيلا تيفيموريوم و السالمونيلا المعوية يجب عليهم تطوير مستعمرات خضراء زرقاء مع أو بدون مركز أسود. في حين أن الأنواع Shigella سوف تنمو مستعمرات زرقاء وخضراء.
يمكنك أيضا تضمين سلالات الإشريكية القولونية ATCC 29212, بروتيوس ميرابيليس, كليبسيلا الرئوية ATCC 700603, المعوية البرازية ATCC 29212 و المكورات العنقودية الذهبية ATCC 25923.
في هذه الحالات ، فإن الخصائص المرصودة هي كما يلي: كولاي و ك. الرئوية في هذه الوسيلة سوف يطورون مستعمرات السلمون إلى البرتقال ، مع ترسب من نفس اللون من حولهم. وفي الوقت نفسه ، سوف تطور Proteus مستعمرات زرقاء وخضراء مع أو بدون مركز أسود.
في حين المكورات العنقودية الذهبية و E. البرازية يجب أن تمنع ، في بعض الأحيان E. البرازية تمكن من النمو كمستعمرات صفراء ، صغيرة جدًا.
من ناحية أخرى ، نظرًا لأن هذا الوسيط لا يتم تعقيمه في الأوتوكلاف ، فمن المهم تقييم عقم الوسط. لذلك ، يجب تحضين كل دفعة محضرة من لوحة إلى صفحتين دون تلقيح عند 37 درجة مئوية لمدة 24 ساعة في الأيروبيوس.
من الواضح أنه لا يوجد نمو من أي نوع على اللوحة.
القيود
-يمكن أن تتطور أنواع البروتيوس في هذه البيئة ويمكن الخلط بين خصائص مستعمراتها وأنواع السالمونيلا أو الشيجيلا. لهذا السبب يجب تأكيد أي مستعمرة مشبوهة من خلال الاختبارات الكيميائية الحيوية.
-من الضروري أن تصاحب استخدام هذه الوسيلة مع أجار أخرى أقل انتقائية ، لأنه إذا تم العثور على الكائنات الحية الدقيقة المطلوبة بتركيزات منخفضة ، فقد لا تتطور في هذه الوسيلة.
-لا تسخن أثناء تحضيرها ، لأن الحرارة الزائدة تغير من تكوين المتوسط.
-قد يبدو أن مستعمرات السالمونيلا غير المعتادة لتخمير اللاكتوز دون أن يلاحظها أحد.
مراجع
- المساهمون في ويكيبيديا. Hektoen أجار المعوية. ويكيبيديا ، الموسوعة الحرة. 13 مارس 2019 ، 23:38 بالتوقيت العالمي. متاح في: .wikipedia.org / تم الوصول إليه في 16 مارس 2019.
- معامل BD BD Hektoen Enteric Agar (HE Agar). 2013. متوفر في: bd.com
- مختبرات بريطانيا. هيكتن آتيك آجار. 2015. متوفر في: britanialab.com
- مختبرات ديفكو فرانسيسكو سوريجويزو. آجار هيكتوين آجار. متاح في: f-soria.es
- دليل ديفكو و BBL ، هيكتان آجار المعوي. 2nd الطبعة. متوفر في: bd.com/europe