الأساس الأخضر أجار مشرق ، إعداد واستخدامات

ال أجار أخضر ساطع إنها وسيلة ثقافة قوية ، مع درجة عالية من الانتقائية. يتم استخدامه حصريًا لعزل سلالات جنس السالمونيلا ، ولكن هناك بعض الاستثناءات ، مثل الأنواع التيفية و paratyphi التي لا تنمو في هذه الوسيلة.

البحث عن جنس السالمونيلا شائع في عينات البراز أو الماء أو الطعام. بهذا المعنى ، يمكن أن تكون هذه الوسيلة مفيدة للغاية. تم إنشاء هذا أجار في عام 1925 من قبل كريستنسن وليستر وجورجنز ، في وقت لاحق تم تعديله من قبل كوفمان.

وهو يتألف من pluripeptonas من الهضم الهضمي للأنسجة الحيوانية وهضم البنكرياس من الكازين ، كما يحتوي على خلاصة الخميرة وكلوريد الصوديوم واللاكتوز والسكروز والأحمر الفينول والأخضر الساطع وأجار آجار.

يتميز بأنه وسيلة غير مضيافة للغاية بالنسبة لمعظم البكتيريا ، ويعزز نمو السالمونيلا ، ومع ذلك فإن بعض القولونيات قادرة على العيش فيه ، وتتطور بشكل ضعيف.

من المهم تسليط الضوء على أن جنس Shigella لا ينمو ولا في هذا الوسط السالمونيلا التيفيموريوم, أو نظيرة السالمونيلا. لذلك ، إذا كان المطلوب هو عزل هذه الكائنات الحية الدقيقة ، فيجب استخدام وسائل أخرى ، مثل أجار XLD وغيرها..

مؤشر

• 1 مؤسسة
  • 1.1 أجار أخضر ساطع
  • 1.2 بدائل أجار أخضر ساطع (BGA)
• 2 إعداد
• 3 الاستخدامات / التطبيقات
• 4 مراقبة الجودة
• 5 المراجع

مؤسسة

أجار أخضر ساطع

كل من المكونات التي تشكل الوسط لديه وظيفة محددة تحدد خصائص وخصائص أجار.

تعد البوريبيبتوناس وخلاصة الخميرة مصدرًا للمغذيات التي تأخذ منها الكائنات الحية الدقيقة النيتروجين والمعادن اللازمة لتنميتها. اللاكتوز والسكروز هما مصدران للطاقة للكائنات الحية الدقيقة القادرة على تخميرها.

الأخضر المشرق هو المادة المثبطة التي تمنع تطور البكتيريا إيجابية الجرام وعدد كبير من الكائنات الحية الدقيقة سلبية الغرام.

كلوريد الصوديوم يوفر الاستقرار الاسموزي إلى المتوسط. بينما يمثل الفينول الأحمر مؤشر الأس الهيدروجيني ، فإنه يتحول إلى اللون عند اكتشاف إنتاج الأحماض من تخمير الكربوهيدرات.

تنمو مستعمرات اللاكتوز والسكروز غير المخمرة في هذه الوسيلة ذات اللون الأبيض ، الوردي أو الشفاف ، على خلفية حمراء. على سبيل المثال ، بكتيريا جنس السالمونيلا.

في حين أن البكتيريا أو سكروز تخمر اللاكتوز قادرة على النمو في هذه الوسيلة ، فإنها تطور مستعمرات ذات لون أصفر مخضر أو ​​أصفر على خلفية خضراء صفراء. على سبيل المثال, الإشريكية القولونية والكلبيلة الرئوية.

بدائل أجار أخضر فاتح (BGA)

هناك بدائل أخرى من أجار أخضر ساطع. نوفوبيوسين آجار الأخضر الجلوكوز الساطع (NBG) و نوفوبيوسين آجار الأخضر الفاتح الجلسرين اللاكتوز (NBGL).

نوفوبيوسين أجار مشرق الجلوكوز الأخضر (NBG)

يحتوي على أجار التربتازاز الصويا ، سترات الأمونيوم الحديديك ، ثنائيات سلفات الصوديوم ، خماسي الفينول ، الجلوكوز ، الأخضر الفاتح ، النوبيوبيوسين والماء المقطر.

يقدم لعزل مستعمرات السالمونيلا من عينات البراز.

في هذه الحالة ، يعتبر الأخضر اللامع والنوفوبيوسين هما المواد المثبطة التي تمنع نمو البكتيريا الإيجابية الغرام وبعض الكائنات الحية الدقيقة السلبية الغرام.

ثيوكبريتات الصوديوم هي مصدر الكبريت وسترات الحديديك هي مصدر الحديد ، وكلاهما ضروري للكشف عن إنتاج كبريتيد الهيدروجين من خلال تشكيل راسب أسود من كبريتيد الحديديك.

الجلوكوز هو الكربوهيدرات المخمرة والفينول الأحمر هو مؤشر الأس الهيدروجيني.

في هذه الوسيلة تتطور مستعمرات السالمونيلا بشكل كبير مع مركز أسود محاط بهالة حمراء يتبعها منطقة مرئية واضحة. بعض سلالات Citrobacter freundii إنتاج مستعمرات مماثلة للسالمونيلا.

نوفوبيوسين آغار الجلاسرول الأخضر اللاكتوز (NBGL)

تحتوي هذه الوسيلة على أجار الصويا التربتيزاز ، سترات الأمونيوم الحديديك ، ثيوكبريتات الصوديوم ، اللاكتوز ، الجلسرين ، الأخضر الفاتح ، نوفوبيوسين والماء المقطر.

الفرق في هذه الوسيلة مع الوسيلة السابقة هو أن الجلوكوز يتم استبداله باللاكتوز والجلسرين ولا يستخدم الفينول الأحمر.

كما يستخدم الوسط لعزل أنواع السالمونيلا ، المستعمرات تتطور باللون الأسود ، عن طريق إنتاج كبريتيد الهيدروجين.

فقط المستعمرات التي لا تنتج الحمض من الجلسرين أو اللاكتوز تحقق إنتاج H₂هذا يكفي ، لأن انخفاض الرقم الهيدروجيني يتداخل مع تشكيل H₂ينتج عن ذلك مستعمرات عديمة اللون لمعظم أنواع البروتيوس والستروباكتر.

إعداد

-تزن 58 غراما من المتوسط ​​المجفف تجاريا. إضافته في لتر من الماء المقطر المزدوج. اخلطي ، دعه يقف بضع دقائق ثم قدم المستحضر إلى مصدر حرارة حتى يذوب تمامًا.

-الأوتوكلاف في 121 درجة مئوية لمدة 15 دقيقة ، لا تتجاوز وقت التعقيم.

-واسمحوا الوقوف وتقديم ساخنة حتى في أطباق بتري معقمة. يجب أن يكون الرقم الهيدروجيني النهائي 6.9 ± 0.2.

-السماح للتصلب وتخزينها في الثلاجة حتى الاستخدام. قبل زرع لوحات يجب أن تأخذ درجة حرارة الغرفة.

-وسط مسحوق أخضر وجاهزة لاتخاذ اللون البرتقالي أو البني المحمر ، اعتمادا على درجة الحموضة والمنزل التجاري. اللون البني للغاية يدل على أن أجار كان محموما.

-بمجرد ترسيخ الأجار ، لا ينصح بإعادة صياغته ، حيث يتدهور الوسيط.

الاستخدامات / التطبيقات

تستخدم هذه الوسيلة للبحث عن سلالات من جنس السالمونيلا من عينات البراز والأطعمة الألبان ، من بين أمور أخرى..

نظرًا لأنها بيئة غير مضيافة إلى حد ما ، فمن المستحسن زرع لقاح وفير إذا تم استخدام العينة المباشرة. خلاف ذلك ، ينبغي أن يتم قبل تخصيب وإثراء العينات قبل الزرع في هذه الوسيلة.

نظرًا لأن بعض سلالات السالمونيلا تمنعها أو تنمو بصعوبة ، فمن المستحسن أن تصاحب هذه الوسيلة مع أجار انتقائية أخرى من السالمونيلا..

يجب أن تخضع جميع المستعمرات ذات السالمونيلا المميزة لاختبارات كيميائية حيوية لتحديد الهوية بشكل نهائي.

مراقبة الجودة

لاختبار الأداء الجيد لوسيط أجار الأخضر الفاتح ، يمكن استخدام سلالات ATCC لمراقبة تطور نفسه على ذلك..

السلالات الأكثر شيوعا المستخدمة لمراقبة الجودة هي: السالمونيلا المعوية ATCC 13076, السالمونيلا التيفيموريوم ATCC 14028, بروتيوس ميرابيليس ATCC 43071, كليبسيلا الرئوية ATCC 700603, الإشريكية القولونية ATCC 25922,  Shigella flexneri ATCC 12022, المكورات العنقودية الذهبية ATCC 6538.

يجب على الثلاثة الأوائل إعطاء مستعمرات بيضاء وردية أو شفافة على خلفية حمراء. السالمونيلا مع تطور جيد و Proteus مع نمو متناثر أو منتظم.

من المتوقع أن تكون مستعمرات كلبسيلا وإيشيريشيا صفراء صفراء ذات خلفية صفراء وفي حالة شيجيلا والمكورات العنقودية يجب تثبيتها.

يجب تخزين الوسيط المجفف في درجة حرارة الغرفة ، في مكان جاف ، لأن الوسيط مرطب جدًا.

مراجع

1. مختبر ديفكو فرانسيسكو سوريجيزو آجار الأخضر اللامع. 2009
2. المختبر البريطاني أجار الأخضر الفاتح. 2015.
3. مختبر BD. دينار بحريني أجار الأخضر. 2013.
4. Koneman E، Allen S، Janda W، Schreckenberger P، Winn W. (2004). التشخيص الميكروبيولوجي. (الطبعة الخامسة). الأرجنتين ، التحرير البنميريكانا إس..
5. Forbes B، Sahm D، Weissfeld A. 2009. Microbiological diagnosis of Bailey & Scott. 12 إد. الأرجنتين. Panamericana S.A Editorial