Vogel-Johnson Agar مؤسسة ، إعداد واستخدامات

ال فوغل جونسون آغار هي ثقافة ثقافة انتقائية صلبة ، انتقائية ، وضعت خصيصا لعزل المكورات العنقودية الذهبية. تم إنشاء هذه الوسيلة من قبل فوغل وجونسون في عام 1960 من تعديل أجار جلايسين التيلوريت الذي صاغه في عام 1955 زيبوفيتز وإيفانز ونيفن.

تألف التعديل في زيادة تركيز المانيتول الموجود في الوسط وفي دمج مؤشر الرقم الهيدروجيني. تتكون الصيغة الحالية من تريبتين ، خلاصة الخميرة ، مانيتول ، فوسفات ديبوتاسيوم ، كلوريد الليثيوم ، جليكاين ، أحمر فينول ، أجار ، 1٪ محلول تلوريت بوتاسيوم وماء.

تجدر الإشارة إلى أن هناك وسائل أخرى ، مثل Vogel-Johnson agar ، انتقائية لعزل المكورات العنقودية الذهبية, مثل مانتول أجار المملحة وأجار بيرد باركر. وبهذا المعنى ، يمكن القول أن أساس Vogel-Johnson agar هو خليط بين مالحة mannitol agar و Baird Parker..

في أول مستعمرات المكورات العنقودية الذهبية تتميز عن طريق تخمير المانيتول وتحويل مؤشر الرقم الهيدروجيني إلى اللون الأصفر. من ناحية أخرى ، في الثانية المكورات العنقودية الذهبية يتميز بتقليل التيلوريت للتيلوريوم وتشكيل مستعمرات رمادية سوداء. ويلاحظ كل من الخصائص في آوغل جونسون.

هذه الوسيلة ، مثل نظيراتها ، مفيدة للكشف عن المكورات العنقودية الذهبية في عينات الغذاء ، والضوابط الصحية للمنتجات الصناعية وفي العينات السريرية.

مؤشر

• 1 مؤسسة
  • 1.1 مساهمة المواد الغذائية
  • 1.2 القوة الانتقائية
  • 1.3 القوة التفاضلية
  • 1.4 التوازن الاسموزي وعامل التصلب
• 2 إعداد
  • 2.1 1٪ w / v محلول تلوريت البوتاسيوم
  • 2.2 فوجل جونسون قاعدة آجار المتوسطة
• 3 استخدام
• 4 مراقبة الجودة
• 5 المراجع

مؤسسة

مساهمة المواد الغذائية

وسط فوجل جونسون يحتوي على مستخلص التريبتين والخميرة. توفر كلتا المادتين أحماض أمينية طويلة السلسلة تعمل كمصادر للكربون والنيتروجين اللازمة لنمو البكتيريا. ستأخذ البكتيريا القادرة على النمو في هذه الوسيلة العناصر الغذائية من هذه المواد.

قوة انتقائية

أجيل Vogel-Johnson قادر على تثبيط نمو البكتيريا سالبة الجرام وحتى بعض البكتيريا إيجابية الجرام ، مفضلًا تطوير المكورات العنقودية الإيجابية المخثر. المواد المثبطة هي البوتاسيوم تيلوريت ، كلوريد الليثيوم وجليكاين.

القوة التفاضلية

المواد التي تصنع هذه الوسيلة التفاضلية هي مانيتول وتيلوريت البوتاسيوم. مانيتول هو كربوهيدرات ، وعندما يتم تخميره ، يتم إنتاج الأحماض التي تحول الوسط من الأحمر إلى الأصفر ، وهو ما يحدث بفضل وجود مؤشر الفينول الأحمر الأس الهيدروجيني.

في حين أن التيلوريت عديم اللون عندما يتم اختزاله إلى التيلورايد الحر المعدني ، يأخذ اللون الرمادي الداكن إلى اللون الأسود.

ال المكورات العنقودية الذهبية تخمر المانيتول ويقلل التيلوريت للتيلوريوم. لهذا السبب المستعمرات النموذجية لل المكورات العنقودية الذهبية في هذه الوسيلة تكون رمادية أو سوداء محاطة بوسط أصفر.

ستشكل البكتيريا التي تنمو في هذه الوسيلة ولا تقلل من التيلوريت أو مانيتول ، مستعمرات شفافة تحيط بها وسيطة حمراء ، حتى أكثر كثافة من اللون الأصلي ، بسبب قلوية الوسيلة عن طريق استخدام الببتونات..

من ناحية أخرى ، فإن البكتيريا التي تقلل التيلوريت ولا تخمر المانيتول ستنمو كمستعمرات رمادية أو سوداء محاطة بلون أحمر عميق.

إذا تم تحضير الوسط دون إضافة تيلوريت البوتاسيوم ، فإن مستعمرات المكورات العنقودية الذهبية أنها سوف تتطور كمستعمرات صفراء ، وتحيط بها وسيطة صفراء ، كما هو الحال في آجار مانيتول المالحة.

التوازن الاسموزي وعامل التصلب

يحافظ فوسفات الديبوتاسيوم على التوازن التناضحي للوسط ويضبط درجة الحموضة إلى الحياد 7.2. في حين أن أجار يعطي اتساق قوي للثقافة المتوسطة.

إعداد

1 ٪ محلول تلوريت البوتاسيوم ث / ت

لا يتم تضمين هذا الحل في الوسط المجفف ، لأنه لا يمكن تعقيمه في الأوتوكلاف. لهذا السبب يتم تحضيره بشكل منفصل وإضافته إلى الوسط المعقم.

تقوم بعض المنازل التجارية ببيع محلول تلوريت البوتاسيوم 1٪ الجاهز للاستخدام. إذا كنت ترغب في التحضير في المختبر ، تابع ما يلي:

تزن 1.0 غرام من البوتاسيوم تيلوريت وقياس 100 مل من الماء المقطر. قم بإذابة التيلوريت من البوتاسيوم في جزء من الماء ثم أكمل كمية الماء حتى تصل إلى 100 مل. تعقيم الحل عن طريق طريقة الترشيح.

فوجل جونسون قاعدة آجار المتوسطة

تزن 60 غرام من المتوسط ​​المجفف ، وتذوب في 1 لتر من الماء المقطر. يسخن الخليط ليغلي للمساعدة في الذوبان التام. أثناء عملية الذوبان يتم تحريك الوسط بشكل متكرر.

تعقيم في الأوتوكلاف في 15 رطلا من الضغط و 121 درجة مئوية لمدة 15 دقيقة. انزعه من الأوتوكلاف واتركه يقف حتى يصل متوسط ​​درجة الحرارة إلى حوالي 45 إلى 50 درجة مئوية. أضف 20 مل من محلول تيلوريت البوتاسيوم المحضر مسبقًا إلى 1٪.

تخلط وتصب في أطباق بتري معقمة. اسمح للتصلب والترتيب المقلوب في لوحات للتخزين لاحقًا في الثلاجة حتى الاستخدام.

يجب أن يكون الرقم الهيدروجيني النهائي للوسيط المعد عند 7.2 ± 0.2.

قبل زرع عينة ، انتظر حتى تأخذ اللوحة درجة الحرارة المحيطة.

لون المتوسطة المعدة باللون الأحمر.

استعمال

على الرغم من أنه يمكن استخدامها لعزل المكورات العنقودية الذهبية في أي نوع من العينات ، يتم استخدامه في الغالب للتحليل الميكروبيولوجي للمنتجات الصيدلانية ومستحضرات التجميل والمواد الغذائية.

يوصى بأن يكون اللقاح كثيفًا. يمكن تنفيذ عملية البذر بالتصاق بمقبض بلاتيني أو عن طريق سطح مع ملعقة Drigalski.

يتم تحضين الأطباق عند 35-37 درجة مئوية لمدة 24 إلى 48 ساعة في الأيروبيوس.

مراقبة الجودة

لتنفيذ مراقبة الجودة لوسط Vogel-Johnson ، يمكن استخدام سلالات التحكم التالية:

المكورات العنقودية الذهبية ATCC 25923, المكورات العنقودية الذهبية ATCC 6538, المكورات العنقودية الجلدية ATCC 12228, الإشريكية القولونية ATCC 25922 أو بروتيوس ميرابيليس ATCC 43071.

النتيجة المتوقعة هي كما يلي: لسلالات المكورات العنقودية الذهبية نمو مرضٍ مع مستعمرات سوداء تحيط بها وسط أصفر. إلى S. epidermidis نمو منتظم مع مستعمرات شفافة أو سوداء محاطة متوسطة حمراء.

وبالمثل ، ل كولاي ومن المتوقع أن يكون هناك تثبيط تام ، ول بروتيوس ميرابيليس تثبيط جزئي أو كلي. إذا نمت ، فسوف تفعل ذلك بشكل ضئيل وستكون المستعمرات سوداء محاطة بلون أحمر متوسط.

مراجع

1. معامل BD. VJ (فوجل وجونسون آجار). 2006. متوفر في: bd.com
2. مختبرات بريطانيا. فوجل - جونسون آجار. 2015. متوفر في: britanialab.com
3. مختبرات بريطانيا. تلوريت البوتاسيوم. 2015. متوفر في: britania.com
4. مختبر Himedia. فوجل- جونسون آجار المتوسطة. 2018. متاح على: himedialabs.com/TD/MU023.pdf
5. قاعدة فوجل - جونسون آجار. دليل ميرك للأحياء الدقيقة. الإصدار الثاني عشر ، الصفحات 502-503. متوفر في: المستخدمين / فريق / التنزيلات
6. المساهمون في ويكيبيديا ، "أغار فوغل جونسون", ويكيبيديا للعيش الموسوعية,   disponível em: wikipedia.org.
7. الفنزويلي قياسي كوفين 1292-89. (1989). الغذاء. العزلة والعد المكورات العنقودية الذهبية. متوفر في:sencamer.gob.ve